质子泵抑制剂提高人胃腺癌细胞化学治疗敏感性研究.pdfVIP

生生澄坐苤查!!!!生!旦笙!!鲞筮!塑堡丛旦』塑g!』婪!z!!!!!y!!：垫：盟!：! ．-——463··—— ● 质子泵抑制剂专题 ● 质子泵抑制剂提高人胃腺癌细胞 化学治疗敏感性研究 陈敏 邹晓平 曹俊 张斌 刘文佳 吴育美 林海 【摘要】 目的探讨质子泵抑制剂(PPI)泮托拉唑(PPZ)是否通过抑制空泡型质子泵来逆转 细胞内外pH梯度，从而增加肿瘤细胞化学治疗敏感性，并探讨PPZ最佳预处理时间、剂量及机制。 方法免疫印迹及免疫荧光法比较PPZ处理前、后人胃低分化腺癌细胞株SGC7901空泡型质子泵 的表达及胞内分布变化。用BCECF-AM荧光探针检测不同浓度PPZ作用不同时间对细胞内pH 值的影响。用四甲基偶氮唑盐比色法和膜联蛋白V一异硫氰酸荧光素一碘化丙啶试剂盒检测化学治 疗药物联合PPZ的细胞毒性和细胞凋亡变化。用阿霉素检测PPZ对细胞内药物蓄积和潴留量的影 PPZ作用24h后，空泡型质子泵表达的相对吸光度值(1．19士0．03和 响。结果10和100肛g／ml 0．70±0．03)明显低于空白对照组(1．534-_0．05)，而1“g／mlPPZ可促进其表达(2．29士0．06)。在 10肛g／“PPZ作用第6和12小时，可见其对空泡型质子泵表达的抑制作用(相对吸光度值分别为 0．32土0．02和0．13±0．02)，在作用24h后可改变空泡型质子泵的细胞内分布。10和100 PPZ tLg／ml 作用24 h可使细胞内pH值(7．44士0．09和7．31±0．06)明显低于空白对照组(7．51士0．05)，10vg／ml h后予化学药物治疗的细胞存活率 及以上浓度的PPZ可逆转细胞内外pH梯度。PPZ预处理24 (58．71％土1．18％)低于单用化学治疗药物(74．33％±i．77％，P0．05)，其总凋亡率(80．81％土 1．16％)和早期凋亡率(77．52％±1．13％)显著高于单用化学治疗药物(26．42％士1．19％和23．18％± 0．92％，P值均O．01)。20、50和100gg／mlPPZ作用24h后的阿霉素释放指数(O．164±0．013、 提高人胃腺癌细胞的化学治疗敏感性。 【关键词】空泡型质子泵；泮托拉唑；抗肿瘤剂 with inhibitorincreases ofhuman adenocarcinomacelllineto Pretreatment sensitivitygastric protonpump CHEN Bin，LfU hl— antitumor Min，ZOU Jun，ZHANGWe，巧缸，wU drugs Xiao-ping，CAo DrumTower Medicine， mei。LjN of Hai．DepartmentofGastroenterology，theHospital，School 210008，China NanjingUniversity，Nanjing To whether inhibitor， [Abstract] investigate protonpump Objective pantoprazole(PPZ)，a could thetransmember vacuolarH+一ATPaseSOastoincreasethe reverse pHgradientbyinhibiting ofhuman aden