LC—MS／MS法测定人血浆中阿奇霉素的含量.pdfVIP

现代预防医学2011年第 38卷第 6期 ModernPreventiveMedicine．2011，Vo1．38．NO．6 ·1l05 为 7L·min～。AM 和 内标莫沙 比利的检测离子对 m／z分别为 1．2-3 样 品预处理 取 100txl血浆 ．加入 内标上作液 (120 794．5／591．4和 422．1／l98．O，离子去簇电压 (DP)分别为 35V ng·mrl，内标贮备液加重蒸水稀释而成 )1o0 ，O．25mol·L-- 和 20V．碰撞诱导解离 电压 (CE)分别为48V和 32V，环 氢氧化钠溶液 100 l，混匀 ，用分析纯二氯 甲烷 3fIll漩涡混 形聚焦电压 (FP)均为 250V，碰撞室射出电压 (CXP)均为28。 合提取 5min，低温离心 7min (3200rpm)，负压抽弃上层 1．2．2 贮备液配制 精密称取阿奇霉素对照品5．2mg(相当于 液 ，转下层液体于尖底试管内，45oc水浴通空气流挥干。残渣 纯的阿奇霉素 5．0mg)，置 50nl棕色容量瓶中用 50％甲醇溶 溶于 200 l流动相 ，进样 5 1。 解并定容至刻度 ，即得 AM贮备液 (100mg·L )，置一35℃冰 1．2．4 方法专属性及最低定量限考察 空 白血浆 、空白血浆加 聿荦f避光保存；精密称取枸橼酸莫沙必利对 照品3．7mg(相 当于 对 照品及样品血浆色谱图见图 1，由图 1可知AM 和 内标保 留 莫沙必利 2．4mg)，置5Ornl容量瓶 中，用 3Ornl乙腈溶解后 ， 时间分别为 2．8和3．6min，无杂质干扰测定 。最低定量限为 1 加纯水定容至刻度 ，即得莫沙必利贮备液 (48mg·L )，置 · 。 4℃冰箱保存 。 279 3．61 2 79 3．6 ． 2．5 3．0 353．0 35 4．0 2．5 3．5 4．() tnin 图 1 空白血 浆 (A)、空白血浆加对 照品 (B)及样 品血浆 (C) 1．2．5 标准 曲线的制备 取 1ITllAM储备液 (100Ixg·ml)加 与未保存放置的结果相 比，RSD均在 1O％以内，由此可知， 50％甲醇 1．44 ，即得标准 曲线 A管工作液 (40960ng·ml)， 血浆’样品在一3O℃低温保存 30d，反复冻融 3次后 ，其浓度无 取 A管工作液 200 加入 7．8rnl空 白血浆 即得标准 曲线 A 明显变化 。此外 。还考察 了萃取物 1O℃放置 28h．溶解后样 管，再用空白血浆对倍稀释即得标准曲线其余各管，其标准曲 品进样室放置 3h重复进样的稳定性 ，结果表明均稳定 。 线各管血浆浓度分别为 l024，512，256、128、64、32、16、 1．2．10 样 品测定 按 “1．2．3”方法处理进样 ．记录药物和 8、4、2和 1ng·ml～。取各浓度管血浆 100 l，按 1．2．3进行 内标的色谱峰面积，以药物与内标的的峰面积比由当 日标准 曲 操作。记录AM和 内标的色谱峰面积 ，以药物与内标 的峰面积 线计算 出血浆样品