平衡透析和差示吸收光谱法研究铅（Ⅱ）与BSA的相互作用.pdfVIP

第 4O卷 第 l期 河 北 工 业 大 学 学 报 2011年2月 Vo1．40 NO．1 J0URNALOFHEBElUNIVERSITY OFTECHN0LOGY February 2011 文章编号：1007—2373(2011)01—0055—05 平衡透析和差示吸收光谱法研究铅(II)与BSA的相互作用 苗风智 ，王改珍 ，贺进田 (1 河北科技大学 环境科学与L程学 院，河北 石家庄 050018；2．河北师范大学 生命科学学院，河北 石家庄 050016) 摘要 使用平衡透析和差示紫外吸收光谱法研究了铅 (II)与牛血清 白蛋白 (BSA)的相互作用．平衡透析的实 验结果表明铅 (II)与BSA的相互作用受缓冲溶液pH的影响，在pH为6．3和pH为5．4条件下，铅 (II)在BSA 上的强结合位点数分别是 1．5个和0．8个，弱结合位点数分别为6个和4个，用非线性最小二乘法拟合 elTum 方程，报道了铅 (II)一BSA体系的逐级稳定常数，Hill系数表明铅 (II)与 BSA 的结合部位之间有负协同效应． 使用差示紫外吸收光谱法研究铅 (II)一BSA体系的电荷转移谱带，发现组氨酸咪唑基是铅 (II)在 BSA 中的优先 配位基团．进一步根据 Zn与Pb竞争结合BSA上的强结合位点，推断Pb在BSA 中优先结合位点是位点A． 关 键 词 铅；牛血清 白蛋白；平衡透析；电荷转移谱带；逐级稳定常数 中图分类号 Rl】4 文献标志码 A TheinteractionbetweenPb (II)ionsandBSAstudiedby equilibrium dialysisanddifferientialabsorptionspectrum M IAOFeng—Zhi，WANG Gai—Zhen ，HEJin—tian (1．CollegeofEnvironmentalScienceandEngineering，HebeiUniversityofScienceandTechnology，HebeiSh~iazhuang050018，China； 2 CollegeofLifeScience，HebeiNormalUniversity,HebeiShijiazhuang050016，China) Abstract ThebindingofPb tobovineserum albumin (BSA) hasbeenstudiedbyequilibrium dialysis．Theresults showedthattheinteractionbetweenPb ionsandBSAwassignificantlyinfluencedbypHofbuffersolution．Thereexisted 1．6and0．8strongbindingssitewithinBSA atpH6．3andpH5．4respectively． Thesuccessivestabilityconstantswhich arereportedforthefirsttimeareobtainedbynonlinearleastsquaremethodfittingBjerrumformula．ForPb 一BSAsys— tem s，TheanalysesofHillplotindicatethatthereexistsweaknegativecooperativeeffectinPb 一BSA systems．Thecharge transitionabsorptionbandsofPb 一BSAsystemhadbeenfurtherstudiedwithdifferentia1absorptionspectrum．Theresults indicatedthathistidineimidazolenitrogenwasthepreferentialbindinggroupsofPb