RAPD技术在泰国香米品种纯度检测中的应用.pdfVIP

安徽农业科学IJournalofAnhuiA ．Sei．2011，39(4)：1939—1941，1946 责任编辑 王淼 责任校对 卢瑶 RAPD技术在泰 国香米品种纯度检测中的应用 徐颖，郑炜，吴薇，荣德福 (浙江省宁波市北仑出入境检验检疫局，浙江宁波315800) 摘要 针对现有的泰 国香米品种纯度检测方法的不足，建立特异、灵敏、准确、具有实用性的泰国茉莉香米品种纯度检测方法，以促进 方法在 口岸实验室的推广。通过对影响RAPD结果的模板DNA、M 、随机 引物、dNTP和 g酶的浓度条件进行优化以及 随机引物的 筛选 ，建立了泰 国茉莉香米法定品种KDML105和RD15的双引物协同RAPD检测方法。通过 2条 DNA分子标记的双隐性特征可以区 分茉莉香米和非茉莉香米品种 。 关键词 RAPD；泰 国香米 ；品种纯度 中图分类号 S121 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2011)04—01939—03 1IIeApplicationofRAPD Technologyin thePurityDetectionof11IaiFragrantRiceVarieties XUYiIlgetal (BeilunEn“y—exitInspectionandQuarantineBureau，Ningbo，Zh~iang31580o) Abstraet AimingattheshortagesofthedetectionmethodsoftheexistingThaifragrantfleevarieties，thepuritydetectionmethodsofThaiHom Maliricevarietieswithmorespecific．sensitivity，accuracyandpraeticalitywereestablishedtofacilitatethepromotionofthemethod sinportlabo— ratory．TwoprimerscooperatingRAPDmethodsofThaiHonlMallricelegalvarietiesKDML105andRD15wereestablishedbasedonthescreen— ingofrandom primerandtheoptimizingoftemplateDNA，M ，random primer，dNTPandTaqenzymewhataffectedRAPD results．Accordingto thedoublereeessivescharactersoftwoDNA moleculemarkeFs． aifragrantricevarietiescanbedividedintoThajHomMallriceanduon— ai Hom Malirice． Keywords RAPD；Thaifragrantrice；Pufftyofvarieties 泰国香米深受我国消费者喜爱，我国是泰 国香米的最大 序列的多态性。它可以在对物种没有任何分子生物学研究 进口国，年进 口量为20万 ～25万t。日前泰国香米市场价格 的情况下，对其进行基因组指纹图谱的构建。由于它具有简 高达450～500美元／t，由于其价格普遍比一般大米贵2倍以 捷、灵敏和对材料要求不高等特性，因此在品种鉴定、基因定 上，在泰国香米中掺混 白大米的现象 日趋普遍和严重。20世 位、遗传图谱构建及遗传关系分析中得到广泛应用 3 。 纪90年代，大部分不合格的香米主要掺混高考米 (korkhor)， 笔者通过对影 响 RAPD结果 的模板 DNA、随机引物 、 现在主要掺混巴吞米 (pathum)。 Mg“、 dNTP和 Taq酶的浓度条件进行优化 ，旨在建立一套适 直到2001年 ，泰国商业部在泰国农业部及私有企业 的 用于进 口泰国香米品种和纯度鉴定的稳定的RAPD技术体 协助下制定了茉莉香米标准B．E．2544，对香米品种进行了严 系，从而研究开发 出一种准确性高、灵敏度高、分辨率高的泰 格的界定，规定只有 KaoDokMali105(KD