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具有分泌蛋白能力的短芽孢杆菌的筛选及鉴定.pdf
42 6 Vol. 42 No. 6
2002 12 Acta Micr obiologica Sinica December 2002
*
彭清忠 张惟材 朱厚础
( 100071)
: ( Bacillus brevis) ,
,
, 800 8
5
: , ,
: Q93- 3 : A : 0001- 6209 ( 2002) 06- 0693- 07
:
; , ; ,
, ,
; ,
[ 1
, ,
[ 2, 3 [ 4, 5
( Bacillus brevis) ,
,
, ,
8 ,
16S rRNA PCR ,
5
1 材料和方法
11
111 : AS11845(ATCC8246) AS 1931
T
, CCTCC AB92068 170021
, DH5JM 109 ,
[ 6
; T2 , LB
112 : : 5% , 5% 10% (TCA) , ,
, ( BSA) , ( KI- I ) [ 6
2
* (00 10018)
: ( 1970- ) , , , , ,
: 2002-0 1-25, : 2002-04- 17
694 42
[ 7 PCR Marker TaKaRa
12
121 : , 5 mL
10 min, LB , 30
LB T2 , 30 24 h, 5%
, 10 min ,
T2
T2 , 30 2d15mL
, 10%TCA, 30min,
20L SDS- PAGE , BSA ,
[ 8
Lowry
122 :
05% T2 , 30 2d 5%TCA ,
; 05% T2 , 30 2d
,
13
[ 6
131 : ,
1%H2 SO4 ( pH68) , HPCM 120
[ 7
132 : , HP6890
MIDI ( 32) ,
133 16S rRNA PCR : [ 9
16S rRNA : Brev174F: 5AGACCGGGATAACATAGGGAAACTTAT3,
1377R: 5GGCATGCTGATCCGCGATTACTAGC3PCR ,
: 94 5min ,
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