奶粉中三聚氰胺的高效液相色谱快速测定法.docVIP

奶粉中三聚氰胺的高效液相色谱快速测定法 摘 要：对高效液相色谱法快速测定奶粉中的三聚氰胺进行方法学考察，选用高效液相色谱法，进行线性范围试验、溶液稳定性试验、重复性试验、中间精密度试验。高效液相色谱法快速测定奶粉中的三聚氰胺，方法线性良好，供试品溶液稳定性好。不受检验条件、试验环境、人员变化的影响，方法操作简单，准确性好。 关键词：高效液相色谱法；快速测定；三聚氰胺 自2008年三聚氰胺事件以来，食品安全问题得到了广泛的关注。“民以食为天”，食物是人类赖以生存的物质基础，食品安全与人类的生命和健康息息相关，在加强和完善食品安全的法律法规以及监督检查力度的同时，作为食品的生产加工销售企业来说，加强对所生产或销售产品的质量控制，保证上市产品的质量尤为重要。本文对高效液相色谱法快速准确地测定奶粉中残留的三聚氰胺进行方法学考察，意在寻找准确可靠的质量控制方法。 1 试验准备 1.1 仪器与试剂 agilent 1260高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)， 甲醇、乙腈、辛烷磺酸钠为色谱纯， 乙醇、三氯乙酸、柠檬酸为分析纯， 试验用水为二次蒸馏水。 1.2 对照品储备液的制备 取三聚氰胺对照品约50mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇-水（9∶1）使溶解．并稀释至刻度．摇匀得1ml约含三聚氰胺1mg的溶液作为对照品储备液。 1.3 样品溶液的制备 取被测奶粉约2g，精密称定，置25ml容量瓶中，加入20％乙醇溶液17.5ml，用10%的三氯乙酸溶液定容至刻度．超声处理10min，摇匀，冷却至室温后，以10000转／分的转速离心处理10分钟，经0.22μm的微孔滤膜过滤，即得。 1.4 色谱条件 选用岛津column vp-ods（150×4.6，5μm）色谱柱，以缓冲液（柠檬酸2.10g，辛烷磺酸钠2.16g，加入约980ml水时溶解，调节ph值至3.0，定容至1000ml）-乙腈（90∶10）为流动相，流速1.0ml／min，柱温40℃，检测波长240nm，进样量20μl。 2 项目及结果 2.1 线性范围试验 分别取对照品储备液0ml、0.02ml、0.05ml、0.10ml、0.15ml、0.20ml置100ml量瓶中，加20%的甲醇溶液稀释至刻度摇匀，得含三聚氰胺0μg/ml、0.2μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml、1.5μg/ml、2.0μg/ml的溶液，取上述溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，以溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，建立直角坐标系，计算回归方程及r值。结果在0～2.0μg/ml的浓度范围内，线性关系良好（如图1）。 2.2 溶液稳定性试验 取我公司生产的奶粉（批号：201112001），按样品制备方法制成供试品溶液。取该溶液分别于0小时、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时进样，记录峰面积。该溶液在各时间点的峰面积值见表1。相对标准偏差（rsd）为0.66%，结果表明：供试品溶液中的三聚氰胺在8个小时内稳定。 表1 溶液稳定性试验 时间（小时）012468rsd% 峰面积（a）865.2866.3859.8867.1855.2854.70.66 2.3 重复性试验 分别精密称取奶粉（批号：201112001）共6份，按样品制备方法制成供试品溶液。取上述溶液各20μl分别注入高效液相色谱仪，记录峰面积见表2。相对标准偏差（rsd）为1.09%，结果表明：方法重复性较好。 表2 重复性试验 样品123456rsd% 峰面积（a）847.2861.9855.5858.9864.3875.21.09 2.4 中间精密度试验 取奶粉样品（批号：201112001），由3名分析人员，分别使用2台高效液相色谱仪在不同时间测定奶粉中三聚氰胺的含量。结果见表3。相对标准偏差（rsd）为0.99%，结果表明：方法受检验条件、试验环境、人员变化的影响较小。 3 讨论 三聚氰胺是一种化工原料，具有毒性，不可用于食品添加。但不法商贩为使奶粉蛋白质含量提高，从中获得巨大的利润，将有毒的三聚氰胺擅自加入到牛奶中。婴幼儿是奶粉最大的消费人群，相关文献表明：宝宝长期食用三聚氰胺超标的奶粉，会出现小便量少，排尿困难等肾结石症状，进一步发展还会出现更为严重的水肿、血尿、贫血、抽搐、昏迷等症状。为了确保进入到市场的奶粉的质量，我公司做了大量细致的工作。高效液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高、可以准确定量的优点，经大量的方法学考察，可以将高效液相色谱法应用于奶粉中三聚氰胺的检测。 参考文献 ［1］谢卓文.浅谈食品质量安全问题［j］.科学与财富，2011，（7）：107-108. ［2］郭晓霖.高效液相色谱法检测乳制品中三聚氰胺的探讨［j］.农产品加工创新版，2011，7（6）：70-71. ［3］田兰，刁娟娟，陈春丽等.