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如何在自动生化分析仪上设定测定酶活性的K值.pdf
维普资讯
6 竹 K馑
临床检验信息 1999年第6卷第2期 45 ·
如何在 自动生化分析仪上设定测定酶活性的 K值
杨振华 卫‘生部临床检验中 北京
~
自动生化分析仪 以其效率高、精密度好 酶的活性 :
而越来越多地进入临床检验实验室。在 自动 酶活性(U/L):△A/rain×vT×lo6/(Ex
生化分析仪上利用连续监测法测定酶活性已 Vu×1)
开始逐步代替过去的比色法。用连续监测法 Z~A/min:每分钟吸光度的变化
测定酶活性时 K值是非常重要的参数,它直 v个:样本体积与试剂体积之和
接影响测定结果的准确度。我们应该如何设 v与:样本体积
定K值 以及不同的设 定方法对测定结果有 l:比色怀光径 (era)
哪些影响,这些问题想必是很多从事这项工 £:摩尔消光系数
作的人员很想知道的。作者拟在此介绍一下 如令K:vTx1伊/(£×Vs×1)
常用的K值设定方法,并根据我们的实验结 则 酶活性 (U/L):AA/minxK
果谈谈我们对如何设定 K值的一些认识,供 上面的 K就是所谓 的K值 。在这里只
大家参考 。 要测定程序确定.K就是一个常数 ,因为它是
一 由e(摩尔消光系数)、l(光径)、v(样本和试剂
、何谓 K值?
体积)决定的。这时只要测得每分钟吸光度
现在我们基本上都是用国际单位来表示 的变化就可通过 K计算出酶 的活性 。在酶
酶的活性。在标准条件下酶活性的 1个 国际 测定中常使用多种指示物,其中以还原型辅
单位 (u)为在 1分钟 内能催化 1Vano).的作用 酶 I(NADH)最为常用。酶测定中常用的指
物发生转变的酶量 。通常以U/L表示酶的活 示物的摩尔消光系数(E)见表 1。
性 。在实际测定中通常根据下面的公式计算
裹 1 酶耐定中常用的指示掬的摩尔请光系数(e)
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· 46 · 临床检验信息 1999年第 6卷第 2期
操作也不很复杂 ,近来 已有很多常规实验室
二、K值的设定方法
使用。但此方法无法对仪器的测定系统如加
K值的设定方法有多种,现将常用的几 样量 以及试剂等造成的系统误差进行校正。
种设定方法 的原理及特点介绍如下 。 测定原理如下 :
根据测定系统实际性能设定 K值 (真实 已知 酶 活性 U/L=AA/min×VT×
K值): 106/(E×1xV。)
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