氧氟沙星注射液细菌内毒素检测方法探讨.pdfVIP

理论广 角 l■ 氧氟沙星注射液细菌 内毒素检测方法探讨 郭海乐 (哈药集团制药总厂) [摘 要]目的：本文对氧氟沙星注射液细菌内毒素检测方法进行了研究与探讨。方法 ：在研究该注射液内毒素检测方法时，研究人员应用不同厂家的鲎试剂 进行了干扰试验 ，并采用了凝胶法。结果：通过实验表明，氧氟沙星注射液内毒素不产生干扰。结论：利用干扰试验，可以提高试验结果的准确性以及可靠性，采用细 菌内毒素检测方法可以代替家兔发。 [关键词]氧氟沙星注射液 细菌内毒素 检查方法 中图分类号：Pl12．2 文献标识码：A 文章编号 ：1009—914X(2015)10—0374—01 细菌内毒素检测方法是一种新型的注射液检测方法，其可以代替家兔发对 可以得出不同浓度内毒素溶液的灵敏度TAL，氧氟沙星注射液稀释的倍数分别 注射液热原进行检测，并且在大容量的注射液中应用比较广泛，通过对 比发现， 取1，2，4，8，16，采用BETTj(对供试品进行稀释 ，达到相应稀释倍数后备用。 细菌 内毒素检测方法具有较高的灵敏度 ，而且操作比较简单，重现性比较好。传 3．2干扰初筛试验 统的家兔法在检测的过程 中，操作比较繁琐，而且对实验条件的要求比较高，不 通过TAL灵敏度的复核结果，试验人员需要制备20支灵敏度为0．25Eu／ml 适合在大规模的热原检测中使用，为了提高检测的质量以及效率，研究人员对 的TAL，取l0支对供试品进行阴性对照 ，然后再取每一浓度的溶液0．Iml，将其 氧氟沙星注射液采用细菌内毒索检测方法的可行性进行了探究，希望可以扩大 加入到反应管中；另外lO支供试品做阳性对照，在1O支供试品溶液中取0．1ml与 细菌内毒素检测方法的推广与应用 。 之前备用的五种不同浓度的供试品进行复溶，混合均匀后在~JllAo．1ml的2 内 一 、 材料、试剂与仪器 毒素，五种浓度的供试品各做2支反应管。显示 ：阴性对照(NPC)系列反应全为 1、材料与试剂 阴性，阳性对照(PPC)系列反应在供试 品稀释倍数<4时为阴性 ，>I4时为阳性。 ①鲎试剂 (TAL规格 ：1ml，灵敏度：0．25Eu／ml，批号：140403，生产厂 表明供试品在较高浓工时对细菌内毒素有抑制干扰作用，而供试品至少4倍稀 家：福州新北生化工业有限公司。) 释 ，并选用对应灵敏度的TAL后则无干扰作用。 ②鲎试剂(TAL，规格 ：0．1ml，灵敏度 ：0．125Eu／ml，批号生 4、供试品的干扰试验 产厂家 ：中国港江海洋生物制品厂。) 由干扰初筛试验可知，选择灵敏度为0．125Eu／ml的TAL，用BET水将3 ③鲎试剂(TAL，规格 ：0．1ml，灵敏度：0．25Eu／ml，批号生 批供试 品4倍稀释后进行干扰试验 。取72支灵敏度为0．125Eu／ml的TAL，其 产厂家 ：中国湛江海洋生物制品厂。) 中18支做内毒素水溶液系列反应，即用0．1rnl的BETT](复溶 ，再分别加已制备 ④细菌内毒素检查用水(BET，规格 ：2ml／支，批号：141224，生产厂家：中 的0．25，0．125，0．06，0．03Eu／ml内毒素溶液0．1ml，每一浓度内毒素做4支 国港江海洋生物制品厂，细菌内毒素含量0．03Eu／ml，pH值6．8～7．2。) 反应管，水溶液阴性对照(NC>做2支反应管；另54支分3组，每组18支做内毒素供 ⑤细菌内毒素工作标准品(csE，规格：100Eu／支，批号：2014—4，中国药 试品溶液系列反应，即用0．1ml4倍稀释液复溶 ，再分别加已制备的 品生物制品检定所提供。