色谱-质谱-质谱分析方法在生物标记物研究中的应用.pdfVIP

维普资讯 第23卷 第2期 大庆石油地质与开发 P．G．O．D．D． 2004年4月 25 文章编号 ：1000—3754 (2004)02-0025-03 色谱一质谱一质谱分析方法在生物 标记物研究中的应用 宋桂侠，李振广，孙国荣，于佰林 (大庆油田有限责任公司 勘探开发研究院，黑龙江 大庆 163712) 摘要：介绍 了色谱．质谱．质谱分析方法及其在生物标记化合物研 究中的应用，通过对比可以看到色谱一 质谱．质谱在检测痕量生物标记化合物、分析复杂甾、萜类化合物定性、定量方面具有独特优势。色 谱．质谱．质谱由于是两级质谱 串联 比色谱．质谱增加了选择性，有 了更强的分离能力，提高了对复杂混 合物如甾、萜类化合物定性和定量的可靠性。色谱．质谱．质谱可以检测到通常色谱一质谱检测不到的含 量低，又被 c，，甾烷掩盖的具有应用价值的c 甾烷和轻质油中痕量生物标记化合物。 关 键 词：色谱．质谱．质谱 ；分析方法；生物标记物 ；应用 中图分类号：TEl35 文献标识码 ：A 色谱．质谱．质谱分析方法 (GC／MS／MS)是现代 检测产生同一碎片离子的所有化合物，它对于检测一 最先进的色谱和串联质谱的组合，是研究复杂混合物 系列结构相似的同类化合物 (如取代 的芳烃、甾、 中组分定性 、定量最有效的手段 ，可 以检测到通常 萜等)时特别有用。 GC／MS检测不到的痕量生物标志化合物。 在中性丢失扫描方式 中，中性丢失是 Ql和 Q3 两个四级杆同时联动扫描特定的质量范围，Q2仍进 1 色谱一质谱一质谱分析原理 行 CID反应。Q3低于 Ql一特定 的质量数，它根据 所研究母体化合物通过质量丢失形成一种中性质量的 色谱．质谱．质谱又称 串联质谱 ，可 以分为两大 碎片来选择 Ql和 Q3的质量差。如检测从羧酸中丢 类，即空间上串联质谱和时间上串联质谱。空间串联 失CO 可选质量差为44。它可以给出相差丢失质量 质谱是由硬件构成的，如通常的磁质谱、四级杆质谱 的母离子谱和子离子谱。色谱．质谱．质谱 由于增加一 仪等。它们可以进行子离子扫描 、母离子扫描和中性 级质谱 ，从而增加了选择性 ，它可以选择感兴趣的化 丢失扫描。 合物进行研究，排除干扰 ，提高灵敏度。 在子离子扫描方式中，质谱仪离子源中形成的离 子进人母离子四级杆 Ql(第一四级杆)，由Ql选择 2 色谱一质谱一质谱在生物标记化合物分 一 定数量母离子 ，通过该四级杆进人碰撞室 Q2 (第 析中的应用 二四级杆)，在碰撞室中和惰性气体碰撞生成较小的 碎片离子，当碰撞气体的压力在适宜的范围时，反应 2．1 分析条件 离子的部分动能转变为内能，由于离子内能提高，导 色谱．质谱和色谱．质谱．质谱分析使用的是美 国 致稳定离子活化分解，称 CAD或 CID反应。经 CID Finnigan公司的 TSQ7000色质联用仪。色谱条件 ： 反应的碎片离子进人四级杆Q3，经Q3扫描获得由选 HP-5MS石英毛细柱，柱长 60m。升温程序为：60 择的母离子产生的子离子质谱图。这种方法可以快速 ℃恒温 1min；从 60o=【升温到 220oC升温速率为 8 的研究