I型胶原膜细胞外基质提取物膜体外构建人工真皮能力比较.pdfVIP

维普资讯 生物医学工程与临床2004年 6月第 8卷 第 2期 BME＆ClinMed，June2004，Vo1．8，No．2 —69一 · 基础研究 · l型胶原膜、胞外基质提取物膜体外构建 人工真皮能力比较 王新文，金 岩 ，刘 源，聂 鑫 ，赵 宇 摘 要 目的 比较 I型胶原与胞外基质 (extracellularmatrix，EM)提取物冻干后形成的膜 (EM膜)在体外构建人工真 皮的能力，以选择一种更有利于人工真皮形成的支架材料。方法 分别使用小牛真皮部分提取的I型胶原蛋 白和胞外 基质提取物冻干后制备基质网架，植入皮肤成纤维细胞，形成人工真皮。用扫描 电镜观察 I型胶原膜和 EM膜的表面形 态结构；选取不同的时间点 ，对种植于两种支架材料上的细胞进行计数 ，并利用间接 ELISA方法检测人工真皮复合物 中的细胞 I型胶原分泌情况，通过统计学的分析手段 ，对细胞的生长情况做出判断；用组织学方法观察人工真皮的形成 情况。结果 扫描 电镜观察结果，两种膜在外观形态上无明显差异；细胞在 EM膜上的增殖速度较 I型胶原膜快 ；ELISA 分析显示，EM一细胞复合物中的成纤维细胞能够分泌更多的I型胶原 ；与 I型胶原膜相 比，EM在培养液中的降解更为 缓慢，种植后的成纤维细胞在 EM膜上生长旺盛，细胞层次明显多于前者，形成了较为明显的真皮样组织。结论 EM膜 适于成纤维细胞的生长 ，体外降解速率慢，是一种较 I型胶原膜更为理想的真皮支架材料。 关键词 胶原：胞外基质；人工真皮 ；组织工程 中图分类号：318．19 文献标识码：A 文章编号 ：1009—7090(2004)02—00l69-03 ComparisonStudyontheAbilityofFormingArtificialDermisBetweenType IandEM CollagenMembranes WANGXin—wen．JINYan．LIUYuan，NIEXin，ZHAOYu (DepartmentofPathology,StomatoolgicalCo ge，theFourth MilitaryMedicalUniversity,Xiart 710032，Shanxi，China) Abstract Objective TocomparetheabilityofformingartificialdemrisbetweentypeIandextracellularmatrix(EM)mem— branes，andselectamorebeneficialflamematerialfortheconstructionofartificialdemr is．Methods Type Icollagenand primarycollagenwereextractedrfomnew—born bovineskin，andthenrfozenintomembranes．Themembranessurfacewasob· servedbySEM． Skinfibroblastswereimplantedonthemembranestoofmr theartificialdemr isandthenobservedafterHE staining．ProliferationabilityofthecellswereobservedbyculturingcellsandthefunctionoffibroblastswasanalyzedbyELISA method．Results Th eEMmembranedegradedslowerthanthetypeIcollagen．Th efibroblastsimplantedontheEMmem— branergewquicklyandwerea