光合细菌混合菌群产氢影响因素.pdfVIP

大 庆 石 油 学 院 学 报 第 34卷 第 4期 2010年 8月 J()URNAIOFDAQINGPETROLEUM INSTITUTE VoI．34 No．4 Aug． 2010 光合细菌混合茵群产氢影响因素 齐云阶 ，张 国欣 ，崔宝臣。，李 睿 ，杨鹤红。 (1．中国地质大学 能源学院 ，北京 100083； 2．东北石油大学 化学化工学院，黑龙江 大庆 163318； 3．大庆石化 公 司 炼油厂 ，黑龙江 大庆 163711) 摘 要 ：以花园土壤 中富集分离出来的光合细菌混合菌群为研究对象，分别考察碳源 、氮源 、初始 pH值、光照方式、 接种量、培养温度对产氢量的影 响．结果表 明：葡萄糖和草酸铵是最适宜的碳源和氮源 ，最大产氢量分别为 23．09mL／l 和0．889mI／I；在酸性条件下的产氢量高于碱性条件 ；在 12h光照一12h黑暗交替光照条件下 ，产氢量高于连续光照； 当接种量为 10 、培养温度为 3O℃时最易形成优势菌种，产氢量最高． 关 键 词：光合细菌；混合菌群 ；产氢 ；产氢速率 ；影响 因素 中图分类号 ：x172 文献标识码：A 文章编号 ：1000—1891(2010)04—0094—03 氢能是一种高效能源，用途广泛 ，使用量大，开发经济高效的制氢技术 已成为急需解决的问题．光合 细菌在厌氧和光照条件下有较高的产氢潜力 ，成为生物制氢的热点．目前 ，国内外对影响光合细菌产氢的 各种因素做了大量研究．王永忠等u以纯化的沼泽红假单胞菌为研究对象，考察了不 同的外界培养条件 和培养基成分对产氢量的影响．谢红刚等 研究得出光合细菌在 pH值为7～8、接种量为2o ～3O 时， 最易形成优势生长．刘灵芝等_l3]主要从影响固氮酶和氢酶的外源生理角度 ，对光合细菌最佳产氢条件进 行了研究．RenNQ等H 以RhodopseudomonasfaecalisRID一53为研究对象 ，考察了混合碳源对产氢量 的影响．BarbosaM J等 分别 以三株产氢光合细菌为研究对象，通过改变碳源和光照强度得出产氢规 律．TaoYZ。【等研究的菌株ZX一5可以利用 】5种碳源产氢，具有处理有机废水的潜力．目前，研究产氢 影响因素多以纯菌种为对象 ，对光合细菌混合菌群的研究比较少，笔者以从花园土壤中富集分离出来的具 有较高产氢能力的混合菌群为研究对象，考察碳氮源、初始 pH值 、光照方式、接种量、培养温度等因素对 产氢量的影响 ，旨在为光合细菌产氢研究提供科学数据． 1 实验 1．1 产氢菌种 产氢菌种来源于前期从花园土壤中富集分离出来的光合细菌混合菌群．该混合菌群经多次产氢试验 筛选 ，具有较高的产氢能力． 1．2 产氢培养基 CsH8NO4Na，0．1g；NaHC()3，0．1g；K2HPO4，0．02g；CH 3CO()Na，0．3g；M gSO4 ·7H2O，0．02g； NaC1，0．15g；生长因子 ，lmL；微量元素，lml；蒸馏水 ，98mI． 1．3 方法 将具有较高产氢能力的光合细菌混合菌群以 10 的接种量接种于装有产氢培养基的血清瓶中，在 5o ℃水浴中加热 3Omin，驱赶瓶内空气，密封，放人生化培养箱中．在温度为 30℃4-0．5℃、照度为 7000 lux条件下厌氧培养 8d后 ，用注射器抽取血清瓶内气体，采用气相色谱仪测定氢气含量． 收稿 日期 ：2009—10 28；审稿人 ：王 俊；编辑 ：陆雅玲 基金项 目：黑龙江省科技攻 关项 目(GZO8B205)；东北石油大学国家大学生创新性实验计划资助项 目(091022009) 作者简介 ：齐云阶(】968一)，男 ，博士生，高级工程师，主要从事水处理新技术方面的研究． ·94 · 第 4期 齐云阶等 ：光合细菌混合菌群产氢影响因素 1．4 仪器及分析条件 SP3420型气相色谱仪，北京北分瑞利分析仪器有限公司生产 ；TCD检测器．色谱分析条件 ：柱温，5o ℃；检测器温度 ，5O℃；热丝温度 ，85℃；载气流速，N ，20mL／min；进样量 ，六通阀进样 ，1mL；TDX—O1 填充柱，2m×3mm．pHS一25数