鸡大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验应用.pdfVIP

．山东童牧苎匿一 20lo年第31卷 鸡大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验应用 衣服德 (青岛市畜牧兽医研究所266100) 摘要通过无菌采取青岛、潍坊、烟台等地区规模养鸡场不同日龄发病死亡鸡的内脏(主要为心 脏、肝脏和气囊干络物)，按采集时间顺序分别编号，进行实验室检验，分离大肠杆菌菌株，在普通 培养琼脂斜面上纯增。在此基础上，通过对治疗大肠杆菌的常用药物敏感试验，筛选出高效敏感药 物，为预防和治疗鸡大肠杆菌病提供了依据。 关键词鸡大肠杆茵分离鉴定药敏试验 中图分类号：s858．3l文献标识码：A 文章编号：1007．1733(20lO)09．0180．03 鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌致病血清型菌株 1．2．1 染色镜检取病死鸡的新鲜心脏、肝脏、 引起的一类疾病的总称。不同品种和日龄的鸡均 干络物等脏器涂片进行革兰氏染色，镜检。 可发病，一年四季均可发生，尤以冬季及夏季多 1．2．2细菌分离，培养特性及形态构造观察细 发。随着养鸡业的迅速发展与集约化饲养，鸡大 菌分离，分别取病死鸡的肝脏、心脏、气囊干络 肠杆菌病己成为鸡群重要的疾病之一。为了控制 物，用点燃的酒精棉杀死表面的杂菌，然后用灭 鸡大肠杆菌在鸡群中的传播，本试验根据病死鸡 菌剪刀在灭菌部位剪开小口，用灭菌接种环小口 的临床症状和病理变化等做出初步诊断，并通过 深处挑取少量组织在麦康凯琼脂平板上，37℃培 实验室检查确诊。通过对治疗大肠杆菌的常用药 养24h，挑取红色单个菌落划线接种于伊红美蓝 物敏感试验，筛选出高效敏感药物，为预防和治 平板，37℃培养24~28h，挑取紫黑色带金属光泽 疗本病提供了依据。 的单个菌落接种于普通琼脂培养基平板，37℃培 l材料与方法 养18~24h，然后取出放4℃冰箱保存备用。另外 1．1材料 取伊红美蓝平板上紫黑色单个菌落涂片，革兰氏 1．1．1 病料病料采自青岛、潍坊、烟台等地区 镜检，观察菌体形状及染色特性。 规模养鸡场的不同日龄发病死亡鸡，包括肉仔 1．2．3 生化试验将上述培养特性及形态，染色 鸡、蛋雏鸡、产蛋鸡鸡，无菌操作采其心脏、肝 反应、排列符合大肠杆菌的菌株，在普通培养琼 脏和气囊干络物，按采集时间顺序分别编号为1．9 脂斜面上纯增，采用糖发酵试验(葡萄糖、乳 号，进行实验室检验。 糖、麦芽糖、甘露糖、蔗糖)、尿素分解试验、 1．1．2培养基主要有普通营养琼脂培养基、麦 吲哚试验、MR．试验、V．P试验进行生化鉴定。 康凯培养基、伊红美蓝培养基。 1．2．4动物试验选15日健康龄雏鸡40只随机分 1．1．3 生化试荆 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露 为2组，每组20只，一组为对照组，不做处理； 糖、乳糖均由杭州微生物试剂有限公司生产。 二组为试验组，腹腔接种肉汤培养物，每只 1．1．4 实验动物本试验所用15日龄健康雏鸡本 O．2ml，观察发病情况，并于雏鸡死后，剖检观察 所实验鸡场提供。 病理变化，并且无菌采心血分离病菌、涂片、革 1．1．5 药敏纸片 左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉 兰氏染色、镜检。 素、盐酸环丙沙星、硫酸新霉素、庆大霉素等药 1．2．5药敏试验按纸片扩散法进行，在无菌条 敏纸片由本实验室按照原料药物治疗剂量和药敏 件下将被检菌密集划线于琼脂平板表面，用无菌 纸片制作方法制备。 镊子将左旋氧氟沙星等21种药敏纸片分别贴于培 1．2方法 养基表面，各片距离均等。贴