凡纳滨对虾卵黄蛋白原和血蓝蛋白mRNA在卵巢不同发育时期的半定量和实时荧光定量PCR分析.pdfVIP

第 34 卷 第2 期 海 洋 通 报 Vol. 34，No. 2 2015 年4 月 MARINE SCIENCE BULLETIN Apr. 2015 Doi ：10.11840/j.issn.1001-6392.2015.02.013 凡纳滨对虾卵黄蛋 原和血蓝蛋 mRNA 在卵巢 不同发育时期的半定量和实时荧光定量PCR 分析 方昱，蔡生力，刘红 （上海海洋大学，上海 201306） （ 摘 要 卵黄蛋 原和血蓝蛋 是凡纳滨对虾 Litopenaeusv annamei）卵巢和/或肝胰腺合成的重要蛋 。利用半定量和荧光 定量PCR 技术分别检测了亲虾卵巢不同发育期卵黄蛋 原和血蓝蛋 mRNA 在卵巢和肝胰腺的相对表达量。结果显示，卵 黄蛋 原mRNA 在卵巢和肝胰腺中均有表达，其相对表达量随着卵巢发育持续增加，在第五期达到最高，在恢复期迅速下 降。根据卵巢和肝胰腺质量的综合计算，凡纳滨对虾的卵黄蛋 中，卵巢的贡献率占主导地位，约占80 % ，而肝胰腺仅为 卵巢的四分之一。血蓝蛋 mRNA 主要在肝胰腺中表达，随着卵巢的发育，表达量呈增加趋势，至第三期达到高峰，其后稍 有下降，但仍然维持在较高水平，在第六期恢复到初始水平。血蓝蛋 是否直接或间接参与了卵黄发生和卵巢发育有待进一 步探讨研究。 关键词 凡纳滨对虾；卵巢；肝胰腺；卵黄蛋 原；血蓝蛋 ；半定量 PCR 技术；实时荧光定量PCR 技术 中图分类号 Q786 ；S917.4 文献标识码 A 文章编号 1001 6932（2015）02-0209-06 Semi-quantitative and real-time PCR analysis of vitellogenin and hemocyanin mRNA during ovarian development stage of shrimp Litopenaeusvannamei FANG Yu, CAI Sheng-li, LIU Hong (Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China） Abstract Vitellogenin and hemocyanin were important protein produced by ovary and/orhepatopancreas. In this study, semi-quantitative and real-time PCR techniques were used to detect the relative expression of vitellogenin and hemocyanin mRNA in different developmental stages of ovary and hepatopancreas of Litopenaeusv annamei. The results showed that vitellogenin mRNA was able to be detected in the ovary and hepatopancreas. The relative expression level was increasing during ovarian development, with highest level in the fifth stage