原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
实时RTPCR法检测非小细胞肺癌淋巴微转移.pdf
328· 生冒耋生堂苤壶!业生!月箍!!鲞
实时RT—PCR法检测非小细胞肺癌淋巴微转移
刘 波 王 伟1 (山东大学医院，山东 济南 250014)
[摘要]
X
术切除区域淋巴结微转移，探讨人肺特异性x蛋白(humanlung-specific
Green
以肺部良性病变切除的20枚淋巴结为对照，采用SYBRI嵌合荧光实时RT．PCR检测NSCLC手术切除区域淋巴结60枚LunxmRNA表达并
定量方法分析结果，有助于早期肺癌转移的检测。
(关键词]逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)；癌，非小细胞肺；淋巴道转移；肺特异性x蛋白，人类
[中图分类号]硒63 [文献标识码]A [文章编号]1005-9202(2007)04-0328-03
近年来，无论是发达国家还是发展中国家，肺癌的发病率和
死亡率均呈逐年上升趋势，已居癌症死亡的首位…。有资料表
明，50％手术治疗后的早期非小细胞肺癌患者，5年内发现远处 18
7(1bp)，
转移并死于该疾病。并且病理确诊的I期非小细胞肺癌患者5 7．TCAGCCT．
年存活率也只有75％旧1。现有的诊断技术未能发现已播散的肿 GGGCGATGTGTAG-3’(194
瘤细胞成为准确肺癌分期分级的一大障碍一o。在肺癌微转移检
测中，目前仍缺乏公认的分子标志物，1wao等¨o采用mRNA差异
(115
显示技术筛选出人肺特异性x蛋白(Lunx)。实验表明Lunx在
为：5’．ACGTCTGCTGGAAGGTGGAC一37和5
所有非小细胞肺癌组织中特异表达，而在正常肺间叶组织及其 TACCCAGG-3’(163
bp)。
他肿瘤组织极少或不表达。因此Lunx可望成为肺癌微转移检 1．3
mR—
测的特异性标志物。本研究通过实时RT．PCR法检测Lunx切取癌旁组织、淋巴结分为两等份，其中一份用10％甲醛溶液
NA和VEGF—C、VEGFR-3在NSCLC患者癌旁组织、淋巴结中的
固定送病理，另一份置液氮中速冻，一80。C冰箱保存，取50—
表达，旨在探讨它们在NSCLC微转移中的意义。 100
mg新鲜组织样品，加1
1材料与方法
者术中采集肿大淋巴结20枚。采集淋巴结时注意防止癌细胞
1．1 研究对象从2004年9月1日一2005年10月31日在
和正常上皮细胞的污染，并在无菌条件下进行。RNA的鉴定：
山东大学第二医院胸外科住院的NSCLC手术患者中随机选取对所有提取得总RNA进行紫外光分光光度定量。
30例。入选病例排除心、肝、肾功能不全，全身情况差及术前检 1．4 cDNA合成
查中发现远处转移者。按国际抗癌联盟(UICC)1997年修订的
450
转录成cDNA。在10“l的反应体系中含组织总RNAng，
pTNM分期标准行TNM分期，I期10例，Ⅱ期9例，Ⅲ期11
文档评论（0）