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第31 卷 第12 期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vol. 31 ，No.12
2009 年 12 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Dec. 2009
鸡传染性法氏囊病病毒VP3 蛋白的原核
表达及其B 细胞抗原表位鉴定
1 1 2 1 1 1 1，3 ，4*
赵 坤 ，郑玉姝 ，赵德明 ，赵 朴 ，赵恒章 ，常新耀 ，王选年
(1. 河南科技学院动物科学学院，河南新乡453003 ；2. 中国农业大学动物医学院，北京100094；
3. 新乡学院，河南新乡 453003 ；4. 河南省农科院河南省动物免疫学重点实验室，河南郑州 450002)
摘 要：为鉴定鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP3 蛋白中的B 细胞抗原表位，本研究将IBDV 的VP3 基因
亚克隆于pET-28a 中，构建了表达重组质粒pETVP3 ，经IPTG 诱导在 E. coli BL21 (DE3) 中表达了重组蛋白
(rVP3) 。Western blot 鉴定表明，rVP3 能被IBDV 抗血清特异性识别。同时，根据IBDV VP3 的氨基酸序列，合成
覆盖VP3 全序列的重叠多肽，并与载体蛋白BSA 藕联制备多肽人工结合抗原。Peptide-ELISA 和Dot-ELISA 检测
728 739 982
结果表明VP3 中有2 个线性表位可以被已制备的单克隆抗体(MAb)识别，即 PRDWDRLPYLNL 和 PKPKPKP
993 818
NAPTQ ；Dot-ELISA 结果显示，在VP3 中还存在另外4 个线性多克隆抗体识别位点： LANAPQAGSKSQR
831 851 872 876 897 961 973
A ， QREKD TRISKKMETMGIYFATP ， ALNGHRGPSPGQLKYWQNTREI 和 QMKDLLLTAMEMK 。这些
抗原表位的鉴定为开发IBD 表位疫苗奠定了基础。
关键词：鸡传染性法氏囊病病毒；VP3 蛋白；原核表达；重叠多肽；B 细胞抗原表位
中图分类号：S852.65 文献标识码：A 文章编号：1008-0589(2009)12-0958-05
Identification of B cell epitopes of infectious bursal
disease virus VP3 expressed in E .coli
1 1 2
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