蝴蝶兰组培不定芽增殖条件的优化.pdfVIP

第26卷第6期 华中农业大学学报 VoL26No．6 of Deo 2007年12月 J6urnal HuazhongAgriculturalUniversity 。蝴蝶兰组培不定芽增殖条件的优化★ 王冬云D 汪建亚2冷+ 蔡 桁约 蒋祥娥趵 (1’华中农业大学园艺林学学院，武汉430070；2’湖北省林木育种中心，武汉430079) 摘要以黄花蝴蝶兰的花梗腋芽诱导出的不定芽为外植体．利用正交设计法研究了培养基的无机营养、 TI)Z、有机添加物和蔗糖4种因素对不定芽增殖的影响。结果表明：蝴蝶兰不定芽增殖的最佳培养基配方为 KC+TI)Zo．20 nlg／L+椰子水200mL／L+蔗糖14g／L+柠檬酸’30Ing／L，其中有机添加物的种类和浓度对不 定芽增殖的影响最大。 关键词蝴蝶兰；不定芽增殖#正交设计；组织培养 682．310．36 中图法分类号S 文献标识码A 文章编号1000一2421(2007)06一0856—03 1．3培养条件 蝴蝶兰(P^口缸e加声s妇B1．spp．)属热带气生兰， 其花大，花期长，花色艳丽、色泽丰富，花形美丽别 培养基附加柠檬酸30mg／L，琼脂6．5g／L，调 min。培养室温 致，如蝴蝶翩翩起舞，因而得名。在热带兰中有“兰 节pH到5．4，121℃下高温灭菌20 h，光照强度l500～ 花皇后”之美称，是近年来最受欢迎的洋兰之一。蝴 度为(25±2)℃，每天光照12 1800 蝶兰是单茎性气生兰，植株很少发育侧芽，且种子极 lx。 难萌发，对其进行常规性的繁殖，增殖速度很慢，故多 2结果与分析 采用组织培养的方法对其进行快速繁殖。本研究在 前人工作的基础上[11]，以黄花蝴蝶兰的花梗芽为材2．1外植体的获得 料；利用正交设计法进行组织培养和快速繁殖，获得 将消毒后的花梗芽按极性插于培养基MS+ 10 了试管苗，为满足市场需求提供了一条有效的途径。 6一BAmg／L上，培养15d后花梗芽逐渐萌动膨 大，1个月后长出带小叶的不定芽。 1．．材料与方法 2-2不定芽增殖 1．1材料 供试材料为湖北省林木育种中心引进的黄花蝴 无机营养、TDZ、有机添加物和蔗糖4种因素对黄花 蝶兰品种，取其花梗(带腋芽)为外植体。 蝴蝶兰不定芽增殖的影响。试验设计的因素、水平 1．2试验方法 安排见表1。 接种当天剪取黄花蝴蝶兰花梗，于超净工作台 将不定芽分别接种在不同处理的培养基上，各 min(在 d左右开始 上用75％酒精浸泡30s，0．1％升汞消毒12 接15瓶(每瓶3芽)。观察到不定芽15 消毒过程中要不断摇晃灭菌瓶让材料充分灭菌)，最 长出绿色的小芽点，20d左右长出小的原球茎，并 后用无菌水冲洗5次。将消毒后的材料先用无菌滤 逐渐生长