鸡大肠杆菌1型菌毛基因簇E基因的克隆与序列测定.pdfVIP

金 陵 科 技 学 院 学 报 Vo1．26，No．4 第26卷 第4期 2010年 12月 JOIⅡ{NAI，OFJ_INLING INSTITUTEOFTECHNOLOGY Dec．，2010 鸡大肠杆菌1型菌毛基因簇E基因的 克隆与序列测定 薛茂云 ，蒋加进 ，陈钟鸣 ，崔生玲。，张志成。，高 琴 ，戴鼎震。 (1．江苏经贸职业技术学院，江苏 南京 211168；2．金陵科技学院动物科学与技术学院，江苏 南京 211196) 摘 要 ：鸡大肠杆菌 l型菌毛是一种重要的致病 因子 ，可以黏附到家禽机体的呼吸道上皮 ，从而 引起机体发病 。l 型菌毛基因簇由35roB，35mE，35mA，35ml，35mC，fireD，mF，mG和fireH 等组成 。在 国外K12株大肠杆菌1 型菌毛 ，E基 因是一个大小为为555bp，具有相变开关功能 的片段 ，我国鸡源大肠杆菌l型菌毛 mE基 因序列 尚未见报道 。本研究通过聚合酶链式反应扩增、克隆到了鸡大肠杆菌MG10株1型菌毛的fimE基因，测定了基 因 序列，并运用相关软件将其翻译成氨基酸序列 。通过对fimE基因序列分析 比较及对fimE蛋白进行预测分析 ，发 现鸡大肠杆菌与Kl2大肠杆菌1型菌毛 的35mE基 因之间的同源性达到99．1％以上 ；亲水性、抗原性预测表明，二 者之间都存在密切 的相似相关性 。结果表明，核酸 同源性为99．5 。35mE基因的核苷酸序列中有5个核苷酸残 基发生了改变 ，而预测氨基酸序列变化仅第 184位氨基酸 由缬氨酸V变为丙氨酸A；其余无核苷酸的变化 。 关键词 ：大肠杆菌 ；1型菌毛；35mE结构基 因；PCR 中图分类号 ：$858．31 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—755X(2010)04—0067—06 TheColoningandSequcencingoftimeGeneofType1Pili inAvianEscherichiacoli XUEMao—yun，JIANGJia—jin，CHEN Zhong—ming，CUISheng—ling。， ZHANG Zhi—cheng，GAO Qin ，DAIDing—zhen (1．JiangsuInstituteofEconomicandTradeTechnology，Nanjing211168，China； 2．JinlingInstituteofTechnology，Nanjing210038，China) Abstract：Type1piliinavian Eschetichiacoliisavirulentfactorthattriggersurinarytract’S infection and degranulation by attaching therespiratory epithelium ofchickens．The gene whichregulatestype1pillcontainssuchsubunitsasfimB，fireE，fireA，fireI，／了7”C，flmD， fireF，fimGandfire ，．AccordingtOtheforeignstudy，_timEoftype1piliinEsche7ichiacoli K12isasegmentof555bpDNAwithswitchfunctionwhiletherearenogenereportsonfireE inourcountry．Inthisstudy，throughpolymeraseschainreaction，thefin,Egeneisamplified byPCR usingtheDNA templateofEscherichiacoliMG10，thenthePCR productisclonedand thenucleotidesequenceisdetermined throu