间接ELISA方法快速检测鲤春病毒（SVCV）的初步研究.pdfVIP

第28卷 第4期 金 陵 科 技 学 院 学 报 Vo1．28，No．4 2012年 l2月 J()『【ⅡNAI，OFJINLING STn弋兀EOFTECHNOLOGY Dec．，2012 间接ELISA方法快速检测鲤春病毒 (SVCV) 的初步研究 郭 闯，陈 静 ，刘 I】猛 ，邹 勇 (江苏省水产技术推广站，江苏 南京 210036) 摘 要：以超速离心纯化的鲤春病毒 (SVCV)免疫大 白兔 ，制备了兔抗SVCV免疫血清，在此基础上建立了快速 检测SVCV 的间接ELISA方法 ，对4O份经过细胞培养和RT—PCR方法检毕的SVC样 品(8份 阳性，32份阴性)进 行验证，符合率 100％。 关键词 ：超速离心；鲤春病毒 ；间接ELISA；细胞培养 中图分类号：$941．41 文献标识码：A 文章编号：1672—755X(2012)03--0079—03 A PreliminaryStudyonRapidDiagnosisofSpringViremia ofCarpVirusbyIndirectELISA GUO Chuang，CHEN Jing，LIU Xun—meng，ZOU Yong (JiangsuAquaticTechnicalPromotionStation，Nanjing210036，China) Abstract：W ithSpringViremiaofCarpViruses(SVCV)purifiedbyultracentrifugation，anex— perimentalrabbitisimmunizedtoproduceantiSVCV serum．Onthatbasis，amethodtorapid— lydetectSVCV byindirect-ELISA isestablished．andfortysamples(eightSVCV positiveand thirty—tWOnegative)areverifiedwith 100 accordancerate，whicharefirstdetectedbycell cultureandRT—PCR． Keywords：ultracentrifugation；SpringViremiaofCarpVirus；indirect—ELISA；cellculture 鲤春病毒血症病毒 (SpringViremiaofCarpVirus，SVCV)是一种弹状病毒科水泡病毒属病毒，能感 染四大家鱼和其他几种鲤科鱼类 ，被 国际兽疫局 (OIE)列为必须申报的疾病 ，我国农业部也将其列为二类 动物疫病L1]。目前国内外对SVCV的检测 ，大都采用传统的细胞培养方法分离病毒 ，并采用RT—PCR进行 鉴定 ，从待检样 品进入实验室到出具检测报告往往需要 15～2Od，检测周期太长，不能满足快速诊断出样 品是否感染病毒的要求，本研究建立的间接ELISA检Nsvcv，仅需要1d时间即可得出实验结果，除具有 检测周期短 、准确的优点，而且操作简便 ，适应临床上快速检测病毒的需求 。 1 试验材料 1．1 实验用毒株 SVCV一81：由本中心从无锡发病鲤鱼中分离并保存。 收稿 日期 ：2012—06—10 基金项 目：江苏省三项工程项 目(PJ2006—48) 作者简介 ：郭闯(1976一)，男，安徽宿州人 ，工程师，主要从事水生动物病害防治及技术推广研究。 通讯作者简介：邹勇 (1975一)，男，江苏泰州人，高工，主要从事水生动物病害防治及科技管理研究。 80 金 陵 科 技 学 院 学 报 第28卷 1．2 实验动物及细胞系 试验用大白兔 (2kg)、ICR小鼠均购于南京军区总医院实验动物中心；CO(草鱼卵巢细胞)购于深圳 出入境检验检疫局水生室，本中心传代至第 12代。 1．3 实验用主要试剂和耗材 弗氏完全佐剂、弗氏