脱氧核酶研究进展.pdfVIP

第23 卷第4 期 CHINA BIOTECHNOLOGY 2003 年4 月 * ** 毛华伟 赵晓东 杨锡强 ( 重庆医科大学附属儿童医院免疫研究室 重庆 400014) , DNA , RNA 、DNA 、DNA 、DNA 、DNA 、 。, , 。 现在的基因药理学中, 反义寡聚核苷酸药物的 了D 在医药和生物学上的不可取代性和开发的必 发展开拓了一个新的领域, 包括反义NDA、反义 要性。 RNA 及核酶。随后又出现具有催化功能的DNA 分 2 子, 称为脱氧核酶(deoxyribo yme, DNA yme/ D ) 。实 质上, D 也是一种反义寡聚核苷酸, 它完善和补充 不同催化活性的D 具有不同的结构, 但基本 [ 1] [3] 了反义寡聚核苷酸药物的范围。自Breaker 等 和 上都由催化部位和臂所构成。Santoro 等 通过体 [2] Cuenoud 等 首先报道D 功能以来, D 的结构和 外筛选, 获得2 种在模拟生理浓度下能切割所有 催化活性已扩展到多样化, 而研究的热点及应用最 RNA 的Mg2+ 依赖型D , 即D 8~ 17 和D 10~ 23 多的还是D 10~ 23 和D 8~ 17 两种。本文就D 的 ( 图1) , 是目前最常应用的两种结构。此两种D s 优点、结构、特性和应用展望等进行简要介绍。 由催化核心和两侧的底物识别结构域构成。D 8~ 1 17 的核心含13 个脱氧核苷酸, 由一短的茎2环结构 和下游未配对的4~ 5nt 区域构成, 茎多数由3 个碱 根据核酸杂交原理, 反义寡聚核苷酸药物与靶 基对构成, 至少2 个为G) C。环是不变的, 序列为 序列杂交, 在基因水平抑制mRNA 的翻译与转录, 5c2AGC23. , 加长茎的长度或改变环的序列, 即丧失 从而干扰病毒蛋白的产生, 达到治疗的目的。但下 催化活性, 未配对区连接茎2环的3c 端与下游底物 面一些问题却制约着它的发展: 分子太大影响其进 结合臂, 序列为 5. 2WCGR23. 或 5. 2WCGAA23. 入细胞的效率, 致细胞内浓度未达治疗水平; 未经 (W= A 或T, R= A 或G) 。D 10~ 23 的底物结合臂 改造的寡聚核苷酸对核酸酶不稳定, 透膜能力差; 由7~ 8 个脱氧核苷酸构成, 催化核心含15 个脱氧 而结构改造或衍生化常常会导致专一性和亲和性 核苷酸, 第8 个核苷酸可为T、