T-钙黏蛋白高甲基化与肺癌发生、发展关系探讨.pdfVIP

·34· 黑龙江医药科学2014年2B第37卷第1期 T一钙黏蛋白高甲基化与肺癌发生、发展关系探讨 王凤玲，隋小芳 (佳木斯大学附属第一医院老年病科，黑龙江佳木斯154003) 摘要：目的：通过检测肺癌组织、良性病变组织和对照组织中CDHl3基因及其甲基化水平，结合临床病理资料，找出其与 着CDHl3基因启动子5’CpG岛高甲基化，且CDHl3基因的高甲基化水平随着肺癌临床分期和淋巴结转移而增高。 关键词：CDHl3；甲基化；肺癌；RT--PCR 中图分类号：R734．2文献标识码：A文章编号：1008—0104(2014)01—0034—02 近年来学者们研究发现CDHl3在多种人类肿痛中表达 减少，基因启动子区CpG岛甲基化引起CDHl3基因失活可 能在肺癌的发生发展中起重要作用。但基因表达下降与甲基 CDHl3基因甲基化水平‘“。 化之间关系，以及基因表达改变与肺癌发生、发展的关系仍 1．3 统计学处理 在探讨中。本研究拟通过检测肺癌组织、良性病变组织和对 采用SPSSl7．o软件，t检验对计数资料作比较分析，相 照组织中CDHl3基因水平和表达变化及其甲基化水平和表 达改变，结合临床病理资料，分析CDHl3基因及其甲基化与 水准。 肺癌发生、发展的关系。 2 结果 1资料与方法 2．1 CDHl3基因在实验各组中的表达 1．1一般资料 见表1。 实验组：取佳木斯大学附属第一医院及肿瘤医院2011— 表1 各癌组织、对照A和B组CDHl3的表达水平(；±s) 10～2012—10问排除术前放疗或化疗而手术切除的非小细 胞肺癌患者肺组织45例，男29例、女16例，年龄(60土5．9)岁。 病理诊断为鳞状细胞癌26例，腺癌19例；有淋巴结转移17例， 无转移28例；按TNM分期I+I期24例、I期21例。对照组 A：取距离肿瘤组织边缘5cm以上的远癌正常肺组织45例为 对照。对照组B：取自同期间内手术的良性病变有10例肺结 核球、23例支气管扩张及12例炎性假瘤术中切除的肺组织共 45例。 实验组与对照组A比较+P0．05，实验组与对照组B比较 1．2 方法 肺组织标本(良性病变肺组织、肿瘤组织)均为肺叶切除 移组与无转移组比较。|P0．05。 2．2 离体后30min内迅速切取，对照组A为取距离肿瘤组织边缘 各实验组CDHl3基因甲基化结果 5cm以上的远癌正常肺组织，各自标本分装。液氮速冻， 见表2。 一80℃低温保存[1]。 表2 各癌组织、对照A和B组基因甲基化阳性率 采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测CDHl3基 TRIml研磨，彻底匀浆后分装 因，取肺组织100mg加入lmL 至EP管lmL／每EP管(组织匀浆量100rag时分装)，颠倒 混匀lo下，室温静置5min，加氯仿115体积(o．2mL)，颠倒混 匀lo下，室温静置5min后4℃，12000rpm，离心15min，转上层 EP管中，加等体积异丙醇(约 水相(约400弘L)于另一1．5mL 400pL)，混匀室温静置10min后4℃．12000rpm，离心lOmin， 弃上清加冰预冷的75％乙醇(用DEPC水配)lmL，4℃实验组与对照组A比较+Po．05，实验组与对照组B比较 7500rpm，离一fi,5min，弃上清，空气干燥5～10min(不能完全干 RNase--free