乙醇热回流提取工艺.doc

目的探讨柑桔皮总黄酮的提取及鉴别方法,以充分利用柑桔皮植物资源。方法采用改进的乙醇热提取工艺，对影响总黄酮提取率的主要因素进行了分析,并对所提取的黄酮类物质进行验证。结果柑桔皮提取黄酮类成分的最佳条件为：乙醇浓度70%；提取温度70；料液比110；提取时间70 min；提取3次。在该条件下提取率可达到3.02%。结论该方法是提取柑桔皮黄酮类物质的有效途径。 【关键词】??总黄酮；提取；柑桔皮；提取条件　　Abstract:ObjectiveTo establish the methods for the extraction and identification of flavonoids from the leaves of Ficus microcarpa L. f ..MethodsMain factors influencing the extraction of flavonoids from the leaves of Orange Peel . were studied by single factor experiments.ResultsOptimized conditions for the extraction of flavonoids was obtained as ethanol concentration70% ；extraction temperature 70；material to solvent 11 0，extraction time 70 min，and extraction for three times . Yield of total flavonoids reached 3.02% under this condition.ConclusionThis method??is ideal to withdraw the flavonoids of Orange Peel.　　Key words:Flavonoids；??Extraction；??Orange Peel；??Extraction conditions? ? 黄酮类(flavontes)化合物是植物光合作用产生的一大类化合物，已知的此类化合物约有两千多种，有以黄酮(2-苯基色酮)为母核的一类黄色色素和黄酮的同分异构体及其还原产物，还包括黄酮醇类、异黄酮类、儿茶素类、双黄酮类及其衍生物。柑桔是我国一大果品资源，1998年我国柑橘产量达1 010万吨，到2005年产量达到1 200万吨。而桔皮占柑桔的20%～25%，每年约有240～300万吨的桔皮生产出来［1］。桔皮中含有黄酮类化合物、叶黄素和芳香油等物质，具有理气、健脾、化痰等功效。研究表明，黄酮类有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抗炎、抑菌、抗癌等方面有显著效果,无毒副作用,并以此开发出多种药品和保健食品［1～7］。? ? 黄酮类作为桔皮的主要药用成分，改进桔皮总黄酮提取工艺,对降低提取成本,提高和稳定提取效率显得尤为重要。本实验以广西桔皮为原材料,采用改进的乙醇热回流提取工艺，旨在最佳条件下获得最佳提取效果。　　1??器材? ? 自然干燥的桔皮、无水乙醇(AR) 、95 %乙醇(AR) 、2550紫外可见分光光度计(日本岛津)、芦丁对照品(中国药品生物制品检定所) 。RE-2000 型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)，SHB-循环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。　　2 方法　　2.1??桔皮总黄酮成分提取工艺及实验安排研究桔皮中黄酮类化合物提取方法时，一般采用溶剂直接提取后浓缩。而笔者在实验过程中发现，桔皮叶中所含的脂溶性色素等物质会使显色法测定总黄酮时产生浑浊现象，造成很大误差。因此，本实验采用石油醚脱脂，冷却静置，过滤除去叶绿素后再测定总黄酮（工艺如下）。? ? 桔皮干粉——石油醚脱脂——冷却静置——过滤沉淀—— 除尽过滤——滤液——测定总黄酮并计算提取率　　2.2??总黄酮的鉴别　　2.2.1??三氯化铝反应取样品溶液点在滤纸上，滴加1%三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈淡黄色，在紫外光下有明显黄色荧光斑点。　　2.2.2??乙酸镁反应取样品溶液点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，加热干燥，紫外光下呈黄褐色斑点。　　2.3??总黄酮的测定　　2.3.1??测定方法依据以芦丁为对照品测定柑桔皮中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。　　2.3.2??对照品溶液制备精密称取芦丁对照品0.008 0 g , 60%乙醇定容至200 ml ,制成40 μg·ml-1 贮备液备用。　　2.3.3??供试品溶液制备将各