广州地区肠道病毒71型感染的的研究.pdfVIP

中文摘要 安全有效的疫苗来预防EV71的感染。中国地域广大，EV71流行特点与规律尚 未掌握，我国EV71毒株与国外的病毒株和临床表现存在差异，其机制尚不清楚。 广州地区是中国的南大门，是我国对外交往的前沿城市，也是港澳台和国外各 种传染性疾病传播扩散的第一站。为防止发生1997～1998年在东南亚包括我国 台湾的大规模暴发和流行，监测广卅I地区的EV71流行株与外地输入株，探讨 EV71神经毒性与病毒基因型和的关系其意义是十分重大的。 本研究目的 本地区EV71感染的流行病学特征；分析近年来我国以及广州地区EV71的病毒基 因型和亚型分类，为鉴定广卅I本地株与国内外输入株打下基础，为我国EV71疫 苗的研制提供本地区第一手资料。 2．从分子水平和细胞水平研究EV71对不同组织和器官的易感性差异，初步 探讨EV71不同临床类型(尤其神经毒性)与病毒基因型、细胞亲嗜性之间的关 系。 方法 1．对患有手足口病、肺炎、无菌性脑膜炎、脑炎、心肌炎、疱疹性咽峡炎 及下肢无力、走路跛行的儿童取咽拭子分泌物、水疱液、大便、脑脊液接种到 阴性毒株及原始标本提取毒株核酸RNA，进一步用EV71特异引物EVl59和 海、武汉、台湾地区的EV71流行株，以及美国、日本、匈牙利、韩国、马来西 亚等国家地区的EV71毒株的核苷酸序列进行比对分析，构建种系进化树。分析 近年来我国以及广州地区EV71的病毒基因型和亚型分类。 2．随机选择已知VPl节段序列的广州地区4例手足口病患者和2001年广州地 Ⅱ 硕士擘位论文 状细胞癌细胞(H印一2)，在光学显微镜下观测细胞病变，按细胞病变的程度予以 分度，并采用实时荧光PCR进行病毒拷贝数检测、绘制病毒复制生长曲线。比较 两种完全不同的临床类型(强噬皮肤性和噬脊髓神经性)毒株，对不同组织来 源的细胞株亲嗜性的差异。 结果 所检出13例EV71病毒感染均为手足口病患者，男性6例，女性7例，男性： 儿童是本年度EV71感染的主要人群。所得序列经同源性和种系进化分析，与中 100％，提示我 国大陆其他EV71病毒株的VPl区核苷酸序列同源性为89．3％ 国大陆地区流行的EV71株在进化上可能属于同一基因型。与EV71病毒C基因 型代表株比较，同源性在89．3％～95．1％，较为接近，差异小于12％o；而与A、 B基因型代表株比较，则同源性在79．6％～84．7％之间，差异大于15．3％。说明广 (包括本实验的4个分离株)组成了一个较独立的小分支，形成了c4亚型。 病病毒株接种Vero 10791、10972，神经系统感染病毒株接种Veto 12h，24h，36h，48h后其平均病毒拷贝 制量无明显差异(P0．05)。③手足口病病毒株接种SK-N-SH12h，24h，36h，48h后 其平均病毒拷贝数分别为103～、105～、10791、109～，神经系统感染病毒株接种 IIl 中文摘要 SK-N．SH 84、105。84、107‘88、109‘94， 12tl，24h，36h，48h后其平均病毒拷贝数分别为103 12h，24h，36h，48h)舌其平均病毒拷贝数分别为103盯、 足口病病毒株接种Hep一2 105’89、107 12h，2411，36h，48h后其平均 91、109‘72，神经系统感染病毒株接种Hep．2 病毒拷贝数分别为103’84、105 胞中病毒复制量无明显差异(PO．05)。⑤两种临床类型病毒株对人神经母细胞 胞(Vero)之间无显著差异(P0．05)。 结论 有1个短暂的小高锋，其流行的时间、发病的程度以及临床表现似乎较往年轻。 年起在我国大陆南方地区可能有较广泛的传播流行；而我国台湾分离的EV71主 湾地区EV71感染的