化学发光分析法测定黑米色素抗氧化作用.pdf

维普资讯 一 一 ．7I{ 第 l8卷第 4期 分析试验室 Vo1．18．No．4 1999年 7月 Analytic~[Laboratory 1999— 07 T5f 9化oI学发光分析法 定黑米色素抗氧化作用 一『? 盛京 (广西医科大学化学教研室 ，南宁 53002]) 摘 要 ：运用化学发光分析法研究了黑米色素抗活性氧能力大小 ·测定 7 黑米色素对全血化学发光 的抑制和清 除 0¨ ·OH、H O 的作用。结果表 晾 明。黑米色素对全血化学发光有较大的抑制作用 ，即对由细胞体 系产生的 活性氧有较大的消除作用；对非细胞体 系产生的活性氧化也有一定 的消 拣弛 除 能力 。 关键词：化学发光分析 }色杰；垫鱼些韭奠；适些毒 中圈分类号；065 文献标识哥 A 文章编号：1O00—0720(1999)04—07604 机体在生理过程或应激过程可产生超氧阴 DG3O3O发光 光 度计 (南京 华 东 电子 管 离子 自由基 (o )、过氧化氢 (H0。)和羟基 自 厂)。 由基(·0H)等活性氧物质，而过量产生的活性 黑米(紫香米)由广东省农科院提供 。黑米 氧则可造成组织细胞损伤 ，引起细胞死亡或细 色 素 的 提 取 ：400g 黑 米 加 入 70 乙醇 胞凋亡 ]。经过多年研究 已经证明自由基与一 1200mL，室温浸泡 ，24h后过滤 。滤 渣加 70 百多种人类疾病有关。本实验用化学发光分析 乙醇荐浸泡 24h，过滤。合并二次滤液．减压浓 方法来评价黑米色素抗活性氧的能力，旨为黑 缩 ，得黑米粗色素提取物 。黑米粗色素提取物硅 米的科学应用提供实验依据 。 胶柱层析 ，先用氯仿 ：95 乙醇一2：8洗脱液 1 试剂、仪器、样品及色素的提取 冼脱。得黑米色素 A收集液 ；然后改用 75 乙 缓冲溶液为无酚红的 pH7．4的 Hanks平 醇洗脱 ，得黑米色素 B收集液。黑米色素 A、B 衡盐溶液 (HBSS)。酵母多糖 (sigma产品)称 两收集液经减压浓缩 ，真空干燥得黑米色素 A 取 30mg酵母多糖悬于 3mL生理盐水中，水浴 和黑米色素B。A、B两样品经定性分析与文 煮沸 30rain后离心 ，弃去上清液 ，沉淀再悬于 献0相似 ，为黄酮花色苷类化台物 。 HBSS缓冲溶液中。终质量浓度为 5g／L。CC保 2 实验方法 存 。鲁米诺 (Merck—Schuchrat产品)称 8．9mg 2．1 样品对全血化学发光抑制作用的测定在 鲁米诺，加入 0．20mL二 甲基亚砜溶解后 ，加 文献0的基础上改进 选用 Wistar大 鼠，后双 一 ● ! ， pH7．4的 Hanks应用液 5OraL，电磁搅拌 5h。 脚注射 3 甲醛 0．]mL 。12h后双脚水肿 。眼 终浓度为 lmmol／L 。冰箱保存 。 部取血。肝素抗凝 。然后立 即按血液 ：HBSS液 收稿 日期 ：199~09—11 资盘来奢 ：国家 自然科学基盘资助项 目，No广西教育厅科研项 目，No．9733 作者简介 ：龙盛京 (1957--)，男，副教授 76 ——