土贝母甙甲在动物体内的吸收,分布,代谢和排泄.pdfVIP

：t一 土贝母甙甲在动物体内的吸收、分布、代谢和排泄 陕西省卫生学校 (i~ ztoos8) 王采清 干立 坚” 马润娣” 姜风 起 陈 萍” … 一 ——…— K土S2，7fc- 摘翼 土贝母甙 甲是从土贝母块茎中分离出来的，具有强抗癌和抗促癌活性的巨环三萜皂甙。本冀研 究其在动物体内吸收，分布，代谢和排泄的特点。 关键调 土贝母啸甲 吸收 分布 代谢 排泄 … 一 一 一 一 一 一 一 一 从土贝母块茎中分离出的土贝母甙甲(下称甙甲)具有强抗癌和抗 促 癌活 性，毒 性低 n— n 。 对慢性宫颈爽疗效理想，对宫颈肥大增生效果尤好。基于前文 已报告的甙 甲定量分析 方法c)‘，我们对其在动物体内的吸收、分布、代谢和排泄规律进行 了研究。 1 材料 仪器 分光光度计 、日本岛津UV-265FW。微量进祥器，上海注射器三厂。 动物t陕西省中医药研究院动物室提供。NI／-I／|~鼠，体重18~24g；封 闭群SD大鼠， 体重150~250g，雌雄兼有。 甙甲 本室提取分离，临用时配成所需浓度的水溶液。实验 中其他化学试剂皆为分析纯。 2 方法与结果 2．1 生物样品甙甲分离条件的探索t先后用不同浓度的三氯醋酸，各种试剂处理组织匀浆。 实验结果表明，各种组织研成1I3匀浆后，加匀浆3倍体积的甲醇 ，振摇5rain，4000r／rain离 心10rain，取上清液蒸干后层析，是从生物样品中分离甙甲的较好条件。 给动物注射不同剂量甙甲，在一定 的时间取组织匀浆、分离，层析、确定 最 佳 用药剂 量。结果表明，肌肉注射 以60mg／kg，静脉注射30mg／kg为宜。 2．2 生物样品中甙 甲的分离泓定 2．2．1 提取、分离及测定方法{将生物样品心、肝、脾、肺，肾和脑组织1g分 别 研 成Lt 3匀浆。另取血浆1ml，尿液1ml。按前述方法处理样品，用微量进样器加入50 l甲醇，振摇， 取l01甲醇溶液点子硅胶G层析板上，以氯仿一甲醇一水 (50；2T：7)(下层)的混合溶趔为展 开剂，常规层析。碘蒸气显色后，划出甙 甲斑 点。待退色后，刮下甙 甲斑点处硅胶转移到带 塞磨口试管 中。同时在薄层板上他处刮下甙甲斑点面积相同的硅胶作空白。给各试管加入l0％ 香草醛球醋酸溶液0．2ml，高氯酸0．4ml，播匀，密塞，放恒温水浴 中，90。C加 热l0rain， 取出后，立即置水中冷却。将试管保持在15～20。C条件下，加冰醋酸4．0ml，摇匀。同法作 空 白。经4000r／min离心10rain，取上清液于~74nm处测定吸收率。 2．2．2． 标准曲线及回收率；将不同浓度的甙甲加入对照大鼠血浆和尿液 中，提取和测定方 法同前，以浓度对吸收度绘制甙甲在血浆和尿 中回收的标准曲线 (见图1)。变 数 经处理， 呈直线相关，相关系数r分别为0．9903和0．9975。甙甲在血浆中及尿中的平均回收百分率分 别为80．75 和85．06 。 2．s 组织分布：20只小鼠，肌注甙甲(60mg／kg)。1h后处死，取各组织研成匀浆 (10只 动物的组织匀浆作为一个样品)，提取分离测定甙甲含量。4只大鼠，肌注60mg／kg甙甲，Ih 后死处，取各组织研成匀浆 (2只动物的组织匀浆作为一个样品)，结果见图2，甙 甲肌注后 ’A(Idrcss}W ang Yoagqiag，ShaazlProvinclalHeMth School，Xi-Ⅱn ¨陕西省中医药研究院生化研究室 ·256 · 在肝和脾内含量较高，血、肺零心【次之，肾和脯较低 。 2．4 甙甲与血浆蛋 白及组织蛋白的结 台率： 用平衡透析 法 测 定 。大 鼠血 浆 与pH7．2， O_s0