用正交设计法优化辣椒ISSR-PCR反应体系.pdfVIP

西 南 农 业 学 报 2011年 24卷3期 1o34 SouthwestChinaJournalofA culturalSciences V01．24 Nn3 文章编号：1001-4829(2011)03—1034—05 用正交设计法优化辣椒 ISSR．PCR反应体系 张卿哲，孟金贵 ，张应华，杨正安，许 彬 (云南农业大学园林园艺学院，云南 昆明 650201) 摘 要：采用正交设计 LI6(4)对辣椒 ISSR-PCR反应体系的5个因素( 酶、M 、模板 DNA、dNTPs、引物浓度)在4水早上进 行优化试验。结果表明，最佳反应体系为：在25 总反应体系中。含1×PCR缓冲液、2．0mmolMg2’、1．5unitTaqDNA聚合酶、0． 25mmoldNTP、0．48~rnol引物、120ng模扳DNA。扩增程序为：95℃预变性5min；94℃变性458，51℃退火 1min，72℃延伸