- 1、本文档共23页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
流式细胞术系列之用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期.ppt
DNA倍体和细胞周期分析 DNA检测的常用术语 表示流式分析中DNA含量的分辨率或精确度。 通常由G0/G1峰的CV来反映【 %CV=(SD/mean)x 100】。 影响CV的因素主要包括两方面:仪器因素(如液流、光路、机器调试等)和样本制备及染色过程对标本的人为影响。 结果分析 CellQuest、WinMDI等软件均可以进行分析,但需要手工进行参数统计和计算; 推荐使用ModFit分析软件(分析如下:) 1、打开软件; 2、在FL2-W/FL2-A散点图中设定单个细胞门(R1),去除聚集细胞,必要时可以设两个门。 3、在FL2-A直方图中显示R1中细胞的DNA含量直方图 注:该软件可以自动分析,也可手动分析;可以分析凋亡、异倍体、各期比例等;结果均自动计算。 * 细胞周期和DNA倍体分析的原理 G0/G1期DNA含量为2C S期细胞,DNA含量开始增加,2C G2/M期细胞,DNA含量开始增加至4C 1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平 2、性细胞DNA含量为1C 3、处于增殖期至分裂期细胞由 2C增加至4C 4、凋亡细胞DNA断裂,含量2C 细胞经荧光染料(碘化丙啶,PI)染色,用流式细胞仪测定细胞DNA含量,可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)的DNA含量(%),可以反映细胞的增殖状态和非二倍体(异倍体)的DNA含量 Diploid: 100.00 % Dip G1: 54.38 % at 46.90 Dip G2: 15.91 % at 91.61 Dip S: 29.71 % G2/G1: 1.95 %CV: 5.23 G0/G1 S G2/M 1. 变异系数(Coefficient of Variation,CV) DI指的是肿瘤样本G0/G1峰的平均道数与人正常二倍体G0/G1峰的平均道数之间的比值。 DI为1 意味着二倍体(2c)(一般正常范围为0.9~1.1)。 倍体(Ploidy):原指染色体数目。流式中用来描述总的DNA含量。 二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。 DI为1.9-2.1 的细胞为四倍体(CV为5%时)。在二倍体和四倍体区域之外的统称异倍体。 2. DNA指数(DNA index,DI)和倍体(Ploidy) DNA检测的常用术语 ModFit分析 ModFit分析 ModFit分析 ModFit分析 ModFit分析 ModFit分析 File analyzed: qq.003 Date analyzed: 3-Jun-2009 Model: 1DA0A_DSF Analysis type: Manual analysis Diploid: 100.00 % Dip G1: 63.02 % at 44.61 Dip G2: 18.55 % at 86.71 Dip S: 18.44 % G2/G1: 1.94 %CV: 6.12 Total S-Phase: 18.44 % Total B.A.D.: 5.45 % Apoptosis: 15.11 % Mean: 19.05 Debris: 6.04 % Aggregates: 1.72 % Modeled events: 2775 All cycle events: 2166 Cycle events per channel: 50 RCS: 6.238 ModFit分析 ModFit分析 【重要参数】 DI(DNA指数, 判断倍体数)=(标本G0/G1期细胞峰的平均荧光道数)/(正常二倍体细胞G0/G1期细胞峰的平均荧光道数) PI(增殖指数, 表示细胞的增殖活性)(%)=(S + G2M)/(G0/G1 + S + G2M)×100% SPF(S期细胞比率, 表示细胞的增殖活性)(%)= S /(G0/G1 + S + G2M)×100% 【倍体和细胞周期分析】 发现DNA异倍体(二倍体峰DI1.1 或0.9;四倍体峰DI2.1 或1.9),诊断为肿瘤或癌前病变; 如无明显异倍体,但有一个突出的4倍体细胞峰和15%的S期细胞,并伴有G0/G1峰的CV9%,提示为肿瘤或增生旺盛的病变 ; 如无明显异倍体,但G0/G1峰的CV增大,并伴有10% ~ 15%的S期细胞和一个突出的4倍体峰,诊断为可疑肿瘤或增生旺盛的病变。 发现癌前病变,协助肿瘤早期诊断 在肿瘤的诊断、预后判断和治疗中的作用 在指导肿瘤化疗中的作用 【临床意义】 *
您可能关注的文档
最近下载
- 2025年(组织、党纪)一对一谈心谈话记录+支部委员与普通党员日常谈心谈话记录.doc VIP
- 《GB/T 18336.3-2024网络安全技术 信息技术安全评估准则 第3部分:安全保障组件》.pdf
- 《图形图像处理》课程标准.pdf
- 交通大学三位一体招生部分试题回忆(数学)问卷6.11资料.doc VIP
- 孔雀东南飞挖空练习附答案.docx
- 降低降低阴道分娩并发症实施方案.docx
- 京族民族文化融入小学美术教学策略研究.pptx VIP
- 乙醇安全技术说明书(MSDS).docx
- 2024年教师招聘考试专业知识(幼儿园)历年试题(附带答案).pdf VIP
- 西安开放大学2022年《现代企业管理方法》平时作业1-4答案.docx VIP
文档评论(0)