氧载体强化氧传递促进法夫酵母虾青素的合成.pdfVIP

菌 物 系 统 22 （3）：424~429, 2003 Mycosystema 氧载体强化氧传递促进法夫酵母虾青素的合成* 梁新乐 励建荣 陈 敏 张 虹 （杭州商学院生物工程系 杭州310035 ） 摘 要： 法夫酵母生物合成虾青素是强好氧发酵过程，溶氧水平直接影响细胞虾青素的产率。 本文对虾青素的氧载体强化氧传递双液相发酵进行了研究。实验结果表明，添加豆油（作为氧 载体）可提高法夫酵母发酵时的溶氧水平，促进虾青素的合成：添加豆油 0.5-5.0% （w/v ），虾 青素产量随豆油添加量逐步提高，最高时达到 2.98mg/L，对照组虾青素产率为 2.50mg/L。并 证明产量的提高是单位质量细胞的虾青素合成效率提高的结果。摇瓶培养时转速的高低不同， 对豆油的最适添加量存在影响。较高摇瓶转速有利于豆油在培养基中分散，从而利于强化氧的 传递。 关键词： 豆油，类胡萝卜素，氧传递，双液相发酵 中图分类号：Q939.96 文献标识码：A 文章编号：1007-3515（2003 ）03-0424-0429 虾青素是一种具有重要生物学活性的、高价值类胡萝卜素，近年的有关虾青素生物合成 的研究论文较多，从菌种筛选、基因克隆、发酵工艺到提取纯化制备等(Rodney et al., 1997 ； Arthyr et al., 1976 ；Fang Cheng, 1995 ；梁新乐等，2000a；梁新乐等，2000b；) 。但虾青素 的产率较低，影响了其工业化开发的进程。以前的研究表明，氧作为法夫酵母虾青素生物合 成反应中的重要底物，对于虾青素生物合成有非常关键的作用(梁新乐等，2000a ；Reynder et al., 1997；William and Johnson, 1995) 。如果发酵中供氧不足，法夫酵母虾青素的合成受到极 大影响，虾青素除产率急剧下降外，而且将不再是法夫酵母积累的主要类胡萝卜素组分；而 其它脂肪族胡萝卜素（分子结构中不含有氧元素的类胡萝卜素）将成为法夫酵母类胡萝卜素 生物合成途径的主要产物，即细胞积累较多的虾青素合成途径中的脂肪族胡萝卜素等中间产 物。Bouvier 等（Bouvier et al., 1998 ）从基因水平研究了氧对类胡萝卜素生物合成途径中相关 酶基因的激活作用，表明在辣椒红素的生物合成中，O2 的存在能明显而快速的激活多种类胡 萝卜素基因的mRNA 的合成与翻译，促进氧掺入β-胡萝卜素分子最终合成辣椒红素。为了 保证法夫酵母虾青素发酵中氧的供应，通常是采用大通气量及高搅拌输出功率相结合的方法， 造成动力成本上升，并因剪应力过大，泡沫增多，不易控制等，从而不利于发酵生产。因此 研究新的供氧方式就十分必要。 近年来，新的强化传氧技术的发展主要方向之一就是，通过在发酵液中引入一种新的液相， 以减少气液传氧阻力，从而提高传氧效率(Rols Goma, 1989; Lowe et al., 1998) 。这种液相一般 *基金项目：浙江省教育厅科研基金项目 Email: dbiot@mail.hzic.edu.cn 收原稿日期：2003-01-02 ，收修改稿日期：2003-03- 18 3 期 梁新乐等：氧载体强化氧传递促进法夫酵母虾青素的合成 425 具有比水更高的溶氧能力，且与发酵液互不相溶，称为氧载体（oxygen-vector ）。通常使用的氧 载体主要有：液态烷烃、油酸、甲苯、全氟化碳、豆油等。其目的就是强化发酵过程的氧传递， 强化供氧。 Rols 和Condoret 等(Rols and Fonade, 1990) 以正十二烷为分散相，以产气气杆菌发酵生产 2, 3-丁二醇为例，实验结果表明当油相分数达到15%~25% 时，k a 值提高了3.5~5 倍，同时菌 L 体的生长速度也明显加快。Beth 等（1990）以全氟化碳为连续相，结果表明，当全氟化碳含量 为75% 时，k a 值提高于5~ 10 倍，并推断在实际的微生物培养体系中生产能力也将随之提高。 L