电化学生物传感器中铁氰化钾的电子媒介作用研究.pdfVIP

第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 C电化学生物传感器与生物分析化学 ，ri C59重化学生物传感器中铁氰化钾的电子媒介作用研究 方成李建平+ (桂林工学院材料与化学工程系，桂林541004) 生物传感器技术正被越来越多的应用在临床化学、生物医学等的监测111。目前商业化的生 物传感试条已超过十余种，其中电化学型生物传感试条测定时不受环境光线与温度的影响， 仪器成本低廉，并且灵敏度更高，因此越来越受到重视。电化学型生物传感试条通常要选用 合适的电子媒介体，它要求媒介体必需具用良好的生物相容性，较好的稳定性，与酶之间的 良好的电子交换能力，并且具有一定的抗生物干扰能力。铁氰化钾是一种较为理想的无机电 子媒介体【2l，已广泛用于制作商品化的电化学型生物传感试条。铁氰化钾的电子媒介作用，一 般认为电子的转移是与酶反应相偶联【3·41，并且酶反应为前反应，受电极反应速度的影响很小， 电流响应受制于酶反应。这导致响应电流只在2—3倍米氏常数范围内有线性关系，与实际应 用中的传感试条的试验结果相矛盾。本文使用印制石墨双电极研究了铁氰化钾电子媒介体的 伏安特性和安培响应特性，揭示了铁氰化钾的电子媒介作用的原理，并进行了试验验证，两 者吻合良好，对以铁氰化钾为电子媒介的生物传感试条的设计有一定的指导作用。 1实验部分 所有伏安及安培法测试均在CHl660B电化学工作站(上海辰华仪器公司)上进行；电极采 mmx3．0mm。 用印制双石墨电极系统，T作电极表观面积为2．0 尿酸溶液：用碳酸锂溶液50．60oC水浴溶解，冷却后配制成0．2 mol／L硼砂缓冲液，40C 下保存。葡萄糖溶液：0．2mol／L，介质为磷酸盐缓冲液。0．1mol／L磷酸盐缓冲液，pH=7．0： O．05 mol／L硼砂缓冲液，pH=8．5。所用试剂除酶为Sigma产晶外，其它均为分析纯：水为二 次水；试验温度250C。 2结果与讨论 2．1伏安特性 分别测定了O．2mol／L铁氰化钾、亚铁氰化钾和它们的混合液的伏安曲线，从图l可以发 现三者均有氧化一还原峰，峰型对称，且铁氰化钾和亚铁氰化钾的混合液的峰电流显著高出铁 氰化钾或亚铁氰化钾的峰电流，并且不是二者峰电流的加和(相同浓度下贬铁氰化钾的响应 值约是铁氰化钾的1／8、铁氰化钾和亚铁氰化钾的混合液的1／600)。原因如下：两电极完全相 同，因此两电极的电位相同，即铁氰化钾的电解电压为零，阳极化扫描电流值先受电极反应 速度控制，随外加电压增大而线性增大；而后受扩散速度控制，电流值随夕b／Jn电压增大而略 有减小。阳极化扫描电极反应与阴极化扫描相同，只是电流方向反向，导致伏安曲线关于电 位和电流零点中心对称。相同浓度的亚铁氰化钾与铁氰化钾的响应值的差异源于电极反应速 度不同，铁氰化钾和亚铁氰化钾的混合液的峰电流显著高出铁氰化钾或亚铁氰化钾的峰电流， 源于两者电极反应的协同效应。 2．2安培响应曲线 分别测定了0．2mol／L铁氰化钾、贬铁氰化钾和和它们的混合液在不同极化电压下的电流 值，绘制曲线如图2。图中可见安培响应随极化电压增大而增大，对0．2mol／L铁氰化钾或亚 铁氰化钾来说，增速不大，但对于混合液却增大明显。 可以预见极化电压的大小和正负均不会影响安培响应值与浓度的线性关系，而只是改变 电流响应值的大小，因此以铁氰化钾为电子媒介时，检测电压可以在O～2v范围内任意选定， 这为实际的检测带来方便。 第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 C电化学生物传感器与生物分析化学 ∞ Ct4 02 aO m -04 ．06 日V Fig．1伏安曲线 Fig．2极化电压对安培响应电流值影响 2-3铁氰化钾和亚铁氰化钾的浓度影响 保持铁氰化钾和亚铁氰化钾的总浓度不变，改变两者的浓度比，测定安培响应值。结果发现 在曲线的下段呈良好的线性关系，即当铁氰化钾转化为亚铁氰化钾的比率小于或等于25％时，安 培响应值与生成的亚铁氰化钾的量呈线性关系；亚铁氰化钾转化为铁氰化钾有类似的结果。