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辐射研究与辐射工艺学报990108 辐射研究与辐射工艺学报 JOURNAL OF RADIATION RESEARCH AND RADIATION PROCESSING 1999年 第17卷 第1期 vol.17No.1 1999 γ干扰素和地塞米松对5-羟色胺刺激的正常 和受γ辐射成纤维细胞生长的影响 高亚兵　崔玉芳　杨　红　熊呈琦　夏国伟　王德文 摘要　用MTT比色、AgNORs银染结合图像分析以及抗Ⅲ型胶原免疫组化技术观察并证 实了γ-IFN和 3 U/L的 地塞米松(Dexa)对成纤维细胞生长的抑制作用。结果如下:(1)培养第3d,250×10 γ-IFN和 正常、受 照射以及5-HT刺激的受照成纤维细胞增殖(OD值示之)均显示出明显的抑制作用;(3) 3 U/L浓 250×10 度的γ-IFN和150mg/L的Dexa对成纤维细胞AgNORs合成显示最强的抑制作用,其AgNORs 颗粒数在 5-HT组分别为对照值的58%和56%,而AgNORs3个定量参数的均值分别为对照值的51%和 44%;(4)上述 浓度的两种抑制剂对5-HT刺激的成纤维细胞Ⅲ型胶原合成也显示明显的抑制作用,在培 养第3dⅢ型 胶原阳性细胞数分别为对照值的62%和43%。 关键词　γ干扰素,地塞米松,成纤维细胞,5-羟色胺,照射,Ⅲ型胶原,增殖抑制 EFFECTS OF INTERFERON-γ AND DEXAMETHASONE ON GROWTHOF NORMAL AND STIMULATED FIBROBLASTS BY 5-HYDROXYTRAPTAMINE 100850) file:///E|/qk/fsyjyfsgyxb/fsyj99/fsyj9901/990108.htm（第 1／7 页）2010-3-22 19:07:45 辐射研究与辐射工艺学报990108 Type IIIcollagen, Proliferation inhibition 　　实验表明,肥大细胞分泌的活性介质5-羟色胺,能够促进成纤维细胞生长,这种作用有 时比组 胺还强(见另文报道)。本研究进一步观察了γ-干扰素(γ-IFN)和地塞米松(Dexa)对5-羟 色胺 (5-HT)促成纤维细胞生长的抑制作用,期望能从肥大细胞角度为器官纤维化的防治提供 一些新的 启示。 1 材料与方法 1.1 成纤维细胞培养 　　用无血清DMEM和10%FCS+DMEM体系对NIH/3T3成纤维细胞进行培养。 1.2 实验分组 　　分为γ-IFN+正常、Dexa+正常、γ-IFN+5-HT、 Dexa+5-HT和γ-IFN或Dexa+5-HT +照射6个组,rhγ-IFN和Dexa分别 为北京四环医学生物高技术中心和上海东风制药厂生 产,5-HT为Sigma公司产品。 1.3 照射 60 -2 -1 　　用 Co γ源一次性照射,剂量30Gy,照射量率为5.26× 10C/kg min,样品距源2.5m。 1.4 细胞计数和离心制片 4/孔。同时加 　　在成纤维细胞指数生长期,将其接种于96孔培养板,细胞浓度为2.5×10 入不同浓度的5-HT、γ-IFN和Dexa培养后第3、5d进行计数;并同时制备细胞离心涂片, 固定后进行组织化学和免疫组化分析。 1 1.5 MTT比色 ［］ 　　加入不同浓度的5-HT和不同浓度的γ-IFN和Dexa于培养第3d,每孔加15μL1%浓度 的MTT(二甲 基二苯乙基溴化四唑,华美公司)15μL, 继续培养4h,用BIO-550型酶标仪在570nm波长下测