蔬菜水果中多农残检测样品前处理方法对比与分析..docVIP

蔬菜水果中多农残检测样品前处理方法与分析2010年1月以来，海南豇豆在全国多个地区连续多次被检测出水胺硫磷、甲胺磷、克百威等禁用农药，由此，农产品中的农药残留问题又一次进入了人们的视线，而农产品农残检测技术也经受了再次考验。瓦里安公司可以为广大食品安全检测实验室提供从样品制备（SPE净化产品和装置）到消耗品（色谱柱等）、仪器分析、方法开发、数据处理及技术支持等一整套的技术解决方案，目前公司已经开发了众多分析方法和常见农药、兽药及抗生素化合物数据库，覆盖600多种农药及蔬菜、水果、饮用水或有机废弃物等多种复杂基质。 瓦里安公司基于国标GB/T 19648-2005方法和欧盟EN 15662 方法，开发了用于蔬菜和水果上的多农残检测样品前处理方案，包括固相支持液液萃取法(SSLLE法)、QuEChERS方法和Carbon/NH2净化法。将该前处理方案与设计独特、功能强大的瓦里安320-MS GC-MS/MS三重四极杆质谱仪配合使用，可组成强大的高毒农药残留分析解决方案。以下是我们通过试验，得到的蔬菜、水果中多农残检测样品前处理及检测方案。 ? 样品前处理方法 固相支持液液萃取法（SSLLE法） ①称样。称取20g已匀浆过的蔬菜和水果样品。②过滤。加入70mL丙酮匀浆3min，抽吸过滤，收集萃取液。过滤后的残渣再用30mL丙酮洗涤并过滤，然后合并萃取液。③浓缩净化。35℃旋转蒸发至残留体积达18mL左右，过ChemElut柱（20g，20mL，Varian Part No净化。④上样。将净化后的萃取液载入ChemElut柱，平衡10min。⑤洗脱。用4×20mL乙酸乙酯分次进行洗脱。⑥再次浓缩。旋转蒸发浓缩近干，用5mL丙酮重新溶解，定容。⑦检测。取1mL制好的样作为测试样，直接进样1～2?L，用GC-PFPD或GC-MS/MS进行检测。 QuEChERS方法 ①称样。称取5g粉碎蔬菜或水果样品，放入50ml特氟龙离心管中。②提取。向离心管中加入10mL水、15ml乙腈和100μL内标（20μg/mL灭蚁灵丙酮溶液），充分振摇1min；再加入4g MgSO4、1g NaCl、1g无水柠檬酸三钠和0.5g柠檬酸氢二钠，充分振摇1min。③离心。在6000r/min离心5min。④混合。另取离心管加入25mg Bondesil PSA吸附剂（BondeSil PSA10g，Varian Part No.、230mg无水MgSO4和2mL萃取液。⑤再次离心。充分振摇30s，6000r/min离心1min。⑥检测。取1mL作为测试样，取上清液浓缩或直接转入样品瓶，直接进样1～2?L，用GC-PFPD或GC-MS/MS检测。 Carbon/NH2净化法（GB/T 19648-2005） ①称样。称取10g水果、蔬菜样品，加入50mL乙腈。②抽滤、定容。匀浆、抽滤，用20mL乙腈淋洗滤纸上的残留物，合并滤液，最后用乙腈定容至100mL。②静置。量取20mL滤液，加入10g NaCl和20mL 0.5mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0），充分振摇10min，静置使溶液分层，弃去水相层。③脱水。将乙腈层溶液过装有无水硫酸钠的漏斗，并用适量乙腈淋洗漏斗，收集全部滤液。④浓缩。在低于40℃温度条件下，浓缩近干，用2mL的乙腈/甲苯（3:1）重新溶解，待净化。⑤SPE净化过程。a 活化：用10mL乙腈/甲苯（3:1）将固相萃取小柱进行活化；b 上样：将2mL样品待测液载入Carbon/NH2（300mg/500mg 6mL，Varian Part No..2264265032）；c 洗脱：用20mL乙腈/甲苯（3:1）进行洗脱；d浓缩：40℃浓缩近干，定容至1mL。⑥检测：直接进样1～2?L，用GC-PFPD或GC-MS/MS进行检测。 ? 以上三种方法均可以用于毒豇豆中甲胺磷和水胺硫磷的检测。但固相支持液液萃取和QuEChERS方法的净化效果略逊于国标GB/T 19648-2005 Carbon/NH2净化法，前两种方法与一般的气相色谱检测器联用，可能会出现一些基质干扰，建议选用气相色谱与选择性更强的脉冲式火焰光度检测器PFPD或三重四极杆质谱仪GC-MS/MS配合使用，从而保证最佳检测效果，有效消除假阳性和假阴性结果。 ? 常规高灵敏度GC-MS/MS分析方法 以下是结合GB/T 19648-2005 Carbon/NH2净化法和瓦里安320 GC-MS/MS色谱质谱的二级质谱多反应监测（MRM）技术的一般分析方法，可用于食品安全实验室进行高灵敏度的农残检测。 色谱条件 色谱柱：VF-5ms，0.25μm，30mx 0.25mm（Varian Part No. CP 8944）；进样口条件：260℃不分流进样；