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甘肃农业大学学生科研训练计划中期考核表
学院:(盖章) 填表时间: 2011 年11 月 8 日
项目名称 牦牛肉品质鉴定和基因的SSCP测定 起止时间 2011年 8 月1~ 2012 年 4 月1 项目批注号 主持人姓名 李艳慧 班级、专业 08动科一班 上学期补课门数 0 门 项目经费支出情况 资助总金额(元) 800(元) 剩余金额(元) 支出科目 金额(元) 备注(注明经费支出时间) 总 计
项目执行情况 项目进展的具体情况(已完成的研究内容)
到目前为止,已经完成了:
1.对选择牦牛(Bos grunniens)天祝白牦牛(108 头)、甘南牦牛(68 头)和青海牦牛(46头)的采血,DNA的提取保存.
2.完成了对DNA的引物设计:扩增牦牛第 4 外显子及部分第 3 和第 4 内含子;根据GenBank 中普通牛 (Bos tauras) LEPR 基因序列(GenBankNo:W_001494806),再 设计 2对引物 P2和P3,其 中P2引物扩增第5外显子及部分第 4和第5内含子,P 3引物扩增第 8外显子及部分第 7和第 8内含子。
3.p2,p3引物完成了pcr条件的摸索,掌握了其最佳的组合温度及退火温度,时间,并通过琼脂糖凝胶电泳的检测,得出明亮的条带。P1引物经多次试验未找到适宜退火温度,电泳检测无明亮条带。
4.p2引物所对应的第五外显子继续进行聚丙烯酰胺凝胶电泳的测试。取2 uL PCR 扩增产物,加 入 8 uL 变性上样缓冲,9 8℃变性 10 min,立 即放入冰浴退火。用 12%的非变性聚丙烯凝在 200 V 电压下,电 泳槽内水循环温度 7℃电泳 19 h,并用银染法染色。经两次实验未发现多态性。
二.研究中使用的具体材料(含参阅的书籍和论文目录,使用的检索目录,实验材料和有关数据等。)
(1)参考的数目:[1] F. Gerbens, F. J. Verburg, H. T. Van Moerkerk. et al.Associations of heart and adipocyte fatty acid-binding protein gene expression with intramuscular fat contentin pigs [J]. Animal Science, 2001, (79):347~354.
[2] 李祯, 曹红鹤, 储明星,等.中外11个猪种H-FABP基因PCR-RFLP的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2003,34(4): 313~317.
[3] 姜延志, 李学伟. 猪脂肪细胞型结合蛋白基因BsmⅠ位点多态性与肌内脂肪含量的相关研究[J]. 中国畜牧杂志, 2006, 42(7):1~3.
[4] Wang Q, Li H, liu S. et al. Cloning and tissue expression of chicken heart fatty acid-binding protein and intestine fatty acid -binding proteingenes [J].AnimBiotechnol, 2005, 16(2):191~201.
[5] Hamilton J A. Fatty acid transport: difficult or easy [J]. Lipid Res, 1998, (39): 467~481.
[6] Storch J, Thumser AE. The fatty acid transpo -rtfunction of fatty acid-binding proteins [J]. Biochim Biophys Acta, 2000, (1486): 28~44.
[7] Zimmerman AW, Veerkamp JH. New insights into the structure and function of fatty acid-binding proteins [J]. Cell Mol Life Sci, 2002,(59): 1096~1116.
[8] Likic V A, uranic N, Macura S. et al. A “structural”water molecule in the family of fatty acid binding proteins [J]. Prot Sci, 2000,(9): 497~504.
[9] Hertzel VA, Bernlohr DA. The mammal
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