发酵生物学.doc

谷氨酸发酵过程研究 06生物科学 黄雪梅 060907030 摘要：谷氨酸发酵在工业生产上有着广泛的应用，主要是生产味精方面。本文主要对谷氨酸发酵流程上的一些原理、方法、流程以及影响生产因素做了大概的介绍。 关键词：谷氨酸、发酵、过程控制 前言：味精是人们常用一种调味品。味精主要以玉米淀粉为原料，其工艺流程中谷氨酸发酵是味精生产的必经步骤，是味精生产关键工序，谷氨酸发酵产酸率及糖酸转化率的高低是衡量发酵技术水平和经济效益的两个重要指标。谷氨酸发酵的工艺流程为：经连续消毒的培养基→在无菌空气中接入经三级种子培养的菌种进行发酵→谷氨酸。 1. 谷氨酸发酵基本原理 发酵新工艺采用的是温度敏感型菌种,由于突变导致DNA 分子上遗传密码的转换, 由该基因指导所译出的酶对温度的变化非常敏感, 在高温下极易失活。而在低温下保持正常的催化作用。因此, 菌体在低温时大量生长, 正常代谢。而在高温时菌体则生长微弱。由于高温使突变菌种的酶失去活性从而导致细胞膜结构的变化, 使细胞膜转变成有利于谷氨酸渗透的样式。从而使得终产物谷氨酸能够不断排除细胞体外。这样就使细胞内谷氨酸产物不能积累到引起反馈调节的浓度, 使得谷氨酸在细胞内不断合成, 在培养基中大量积累谷氨酸, 一般可达17%以上。根据菌种这一特性, 可以依据不同的工艺条件来控制菌种最适生长温度大量培养菌体, 然后在适当的时间将温度提高, 使菌体停止生长而大量产酸[1]。 2. 菌种的选育 (a) 菌种.(b) 培养基. (1) 斜面培养基. (2) 选择性培养基. (3) 发酵培养基. (c) 分析方法. (1) 谷氨酸. (2) pH. (3) 还原糖. (4) 菌体生长量检测. (d) 诱变处理及筛选取方法. (e) 筛选的原理和方法[2]。 3. 发酵过程的控制 接种量的控制：加大接种量, 菌体生长快, 便于控制工艺条件使菌体很快向生产型转变, 这样发酵产酸速度快。因为同一种谷氨酸生产菌单位生产谷氨酸的数量是常量, 况且大量移种过程中把微生物生长和分裂所必需的代谢物即核糖核酸一起带进去, 从而有利于微生物立即进入对数生长期, 用于长菌的糖耗很少。所以加大接种量能缩短发酵周期, 提高产酸, 提高转化率,提高设备利用率, 并能减少染菌机会。 初糖浓度的控制：在不同初糖浓度下, 菌体浓度达到饱和值的时间是不一样的。初糖浓度的提高对菌体的生长有抑制作用。不同初糖浓度下发酵过程中菌体浓度的变化发酵初糖控制在一, 原则是“ 低糖起浓糖流加”, 流加糖量占总投糖量的比重要, 这样有利于提高转化率, 并且要稳定初糖浓种大度。 生物素用量的控制：采用大接种量工艺, 生物素用量要少, 比正常亚适量工艺要少。提倡使用复合生物素, 玉米浆尽量改用新鲜的玉米浸泡水在淀粉工序稳定的前提下, 避免玉米浆蒸发浓缩后一些杂质和副产物带入发酵中[3]。 高产、纯正、优良的菌种是保证发酵成功的前提在菌种的保藏和培养过程中, 和一切生物发酵生产一样, 菌种是发酵生产成败的内因。此外，控制好主要原料的质量并延伸控制原料的生产工艺本公司谷氨酸发酵的主要原料—葡萄糖折纯约占发酵液总体积的20.0%, 初糖和流加糖的总体积占发酵液总体积的60%左右, 其内在质量对发酵的产酸和转化率影响很大, 控制好糖液质量和糖液生产工艺及其上游工艺———淀粉的生产工艺对发酵可起到事半功倍的效果[4]。 4. 影响发酵的因素 4.1 内因 发酵法生产谷氨酸, 首先应筛选一株具有一定特性的菌种, 能在10 %以上高质量分数的葡萄糖培养基中生长, 并产生5 %以上高质量分数的谷氨酸。这就要求该菌种必须具有以下生理条件：生物素缺陷型、具有CO2 固定反应的酶系、异柠檬酸裂解酶活力欠缺、α - 酮戊二酸氧化能力微弱、L - 谷氨酸脱氢酶活性强。 4.2 外因 菌种具有了特定的生理性能, 还必须给予特定的环境条件, 才能充分发挥菌种的优良特性,使谷氨酸的高产成为现实。在实际生产中, 影响谷氨酸合成的环境因素主要表现在以下几个方面：发酵液的碳氮比、生物素、发酵温度、pH值、NH4 和P 的含量，此外，还有通风量和泡沫的控制[5]。 在生产操作上也必须严格遵循流程，主要有：严格执行设备检查及环境灭菌制度、完善供风系统，膜过滤器的应用, 大大改善了发酵用风的质量, 但供风系统存在的问题依然不容忽视。其工艺流程: 高空采风→粗过滤→空压机→储气罐→一级冷却器→旋风分离器→二级冷却→丝网除沫器→加热器→过滤器→发酵罐。把好离交废液排放关[6]。 谷氨酸发酵的关键在于发酵培养期间谷氨酸生产菌细胞膜结构与功能上的特异性变化, 使细胞膜转变成有利于谷氨酸向膜外渗透, 即完成由谷氨酸非积累型细胞向谷氨酸积累型细胞的转变。这样, 由于终产物谷氨酸不断地排出细胞外,