153.高压蒸汽灭菌生物指标菌操作规程.docVIP

赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 高压蒸汽灭菌生物指标菌操作规程 编 码 SOP-ZL-00-153 页 数 2—1 实施日期 制 订 人 审 核 人 批准人 制订日期 审核日期 批准日期 制订部门 质管部 分发部门 质管部 目 的：建立高压蒸汽灭菌生物指标菌—嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953）菌片的使用，规程，保证正确使用，对高压蒸汽灭菌效果进行验证。 适用范围：本标准适用于用高压蒸汽灭菌生物指标菌—嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953）菌片对高压蒸汽灭菌效果进行的监测。 责 任：高压蒸汽灭菌操作人员、QA检查员、QC微生物检验员 内 容： 1、依据： 高压蒸汽灭菌生物指标菌（嗜热脂肪杆菌芽胞）菌片使用说明书。 2、程序： 2.1.采用生物灭菌指标菌来检查高压蒸汽灭菌效果是最科学、可靠的检测方法。嗜热脂 肪杆菌芽胞是国际公认的生物指标菌。该菌具有以下特点： 2.1.1.最适生长繁殖温度为56℃,培养24小时即可形成菌落。 2.1.2.该菌为需氧芽胞杆菌，其细菌繁殖体对培养基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨 琼脂上呈米黄色。 2.1.3.该菌无毒，热抗性稳定，在4℃冰箱下保存6个月抗力无明显下降，在常温下（20℃左右）可保存1个月。 2.1.4.热死亡时间为121℃，3.9分钟阳性，19分钟阴性，D10值1.3～1.9分钟,符合美 国兽药典规定标准。 2.2.结构：本生物指示剂由菌片、恢复培养基和外管组成，菌片由嗜热脂肪杆菌芽胞制备而成，染菌量为5.0×105～5.0×106cfu/片。 2.3.使用方法： 2.3.1.本生物指示剂适用于各型压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。 2.3.2.使用时，将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌 器的规定位置。 赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 高压蒸汽灭菌生物指标菌操作规程 编 码 SOP-ZL-00-153 页 数 2—2 2.3.3.按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。 2.3.4.灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具或一夹子 夹住菌管下部，将管内安瓿挤碎，让培养液流出浸没菌片。然后将菌管放于56℃温箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果。 2.4.结果判定：培养后生物指示剂的培养液由紫色变为黄色即表示有菌生长、判定为灭菌不合格；仍为紫色者为无菌生长，判定为灭菌合格。 2.5.注意事项： 2.5.1.生物指示剂管从压力蒸汽灭菌器内取出或从冰箱内取出需在室温下放10min左 右，再夹碎安瓿，以免过热或过冷夹碎外管。 2.5.2.恢复培养液在56℃培养时间过长（72小时以上），阳性管黄色容易消退，培养液逐渐干燥，应注意每天观察，随时记录阳性结果。