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低温沼气发酵微生物区系的筛选及其宏基因组文库构建_成晓杰
DOI ：10.13523/j.cb
Ch ina B iotechnology, 20 10, 30( 11) : 50-55
*
1, 2 1 1 1 3 1, 2**
成晓杰 仇天雷 王 敏 张 姝 蔡金国 高俊莲
( 1 100097 2 100048)
( 3 3 100 12)
从四川浙江山西北京等地采集冬季产气良好户用沼气池及沼气工程中的沼液样品
为微生物接种源, 在实验室条件下进行了500m l反应器的梯度降温模拟沼气发酵试验, 筛选出5
个在 21e 18e 和 15e 等不同温度下均可正常产气的沼液样品 Z-2Z -3Z-6Z-8 和 Z-10, 选取
其中3 个产气量较高的沼液样品 Z-3Z -6和 Z-10 为接种源, 进一步建立了 2 500m l反应器实验
室模拟 15e 低温沼气发酵系统, 经过连续传代筛选获得一个在 15e 低温下产气量较高且稳定的
3 3
沼气发酵系统 Z-6, 产气率达到 0 15m /m d提取该系统内沼气发酵微生物宏基因组 DNA, 以
pB lu escrip t SK ( + )质粒为载体成功构建了约 10 000 个克隆的沼气发酵微生物宏基因组质粒文
库随机分析文库中的克隆结果表明, 该文库的外源片段平均长度约为 5kb, 文库总容量为 48
Mb, 插入片段带型多样性较高该文库的建立为沼气发酵过程中水解酶基因资源的挖掘利用奠
定了基础
低温沼气 沼气发酵微生物区系 宏基因组文库
Q75
,
[4 ]
, ,
, , ,
, ,
,
[ 1-2]
, ,
, DNA, ,
, ,
1
1. 1
, , ,
1 1 1 细菌菌株和质粒 E. co li DH 5A
,
pB lue scrip t SK ( + )
[3]
1 1 2 样品采集
: 20 10-07-2 1 : 20 10-08-13
* ( 508100 1) 8,
** , : gaojun lian@ baafs net cn 1
20 10, 30( 11) : 5 1
1
Tab le 1 Sam pling sites and the ferm entation ,
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