病原微生物学第七章细菌感染的检查方法.ppt

第七章　细菌感染的检查方法与防治原则 第一节　细菌感染的实验室诊断 一、临床标本的采集及送检原则 1、根据不同疾病以及疾病的不同时期，采集不同部位的标本 2、早期采集： 　◆ 疾病早期 　◆ 使用抗菌药物之前 ◆机体免疫因素形成之前 ◆未出现合并或继发感染之前 3、注意无菌操作，避免人为污染。 4、标本的量要够，快接种（床旁），尽快送检 5、标本做好标记，检验单填写标本种类、检验目的、临床诊断。 　 标本采集的准确性关系着检查结果的可靠性！ 二、细菌的检测 （一）细菌的形态学检查 1、直接镜检 显微镜放大 （1）不染色标本的检查 ◆ 主要用于观察病原菌的某些形态特点及运动性 ◆ 常用的方法有压滴法和悬滴法。 ◆ 暗视野显微镜或相差显微镜观察 （2）染色标本的检查 单染色：只用一种染料进行染色 　　　　可分正染和负染 　　　　用于观察细菌形态，不能鉴别染色性。 复染色：用两种或两种以上染料进行染色 　　　　常用的有革兰染色、抗酸染色、荧光染色 　　　　既可观察形态、结构，又可鉴别染色性。 （二）细菌分离培养与鉴定 细菌检查的一般程序 1.细菌的分离培养 ◆ 菌落形态特征：大小、表面、透明度、边缘、高度、色素、溶血、气味 2.生化试验 ◆ 分解产物鉴定（生化反应试验） 3.血清学鉴定 已知的特异性抗体检查未知的细菌，确定细菌的种、型。玻片凝集试验 4.动物实验 选择敏感动物用于分离、鉴定致病菌，测定细菌的毒力。 5.药物敏感试验 纸片扩散法、稀释法 最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）能够完全抑制培养基中细菌生长的最低药物浓度。 最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）能够杀死培养基中细菌的最低药物浓度。 6.自动微生物鉴定和药敏分析系统 （三）细菌抗原的检测 原理：用已知的特异性抗体检测未知的细菌抗原成分 酶免疫技术、协同凝集实验、免疫荧光技术、对流免疫电泳、免疫印迹技术 （四）细菌核酸的检测 　1.聚合酶链式反应（PCR） 2.核酸杂交技术 3.16s rRNA基因序列分析 　三、细菌感染的血清学诊断 原理：用已知的细菌或特异性抗原检测病人血清或其他体液中的抗体及其效价的变化。 采用双份血清 直接凝集试验、乳胶凝集试验、中和试验、ELISA等 第二节 细菌感染的特异性预防 一、人工主动免疫 （一）疫苗 1.死疫苗：用物理、化学方法杀死病原微生物，但仍保持其免疫原性的一种生物制剂。 2.减毒活疫苗：通过毒力变异或从自然界直接选择出来的弱毒株或无毒株经培养后制成的疫苗。 表7-1 活疫苗与死疫苗的比较 区别点 ? 活疫苗 死疫苗 性状 活 死 接种次数和剂量 少（1次） 多（2～3次） 免疫类型 体液免疫和细胞免疫 体液免疫 免疫效果 1~5年或更长 0.5~1年 安全性 毒力回复 安全 稳定性 不稳定 稳定 保存 不易保存 易保存 4℃存活2周 4℃保存1年以上 3.类毒素 4.亚单位疫苗 5.基因工程疫苗 6.重组载体疫苗 7.核酸疫苗 二、人工被动免疫 1.抗毒素 2.抗菌血清 3.胎盘球蛋白、血清丙种球蛋白 4.细胞因子等 表7-2 两种人工免疫方法的比较 项目 主动免疫 被动免疫 免疫物质 抗原 抗体 接种次数 1～3次 1次 免疫出现时间 2～4周 立即 免疫维持时间 数月～数年 2～3周 主要用途 预防 治疗和紧急预防 * *