血清清球蛋白分离（新）.pptVIP

盐析法 盐析法是在蛋白质溶液中，加入无机盐至一定浓度或达饱和状态，可使蛋白质在水中溶解度降低，从而分离出来。 水化膜减弱、消失。蛋白质溶液中加入中性盐后，由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化膜减弱乃至消失。 蛋白质表面的电荷大量被中和。中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，蛋白质分子之间聚集而沉淀。 像筛子一样，但相反的是，大分子先被洗脱，小分子后下来。 * Pr 镨 * 4.88 5.06 5.06 5.12 6.85~7.3 DEAE膜是一种季铵碱 * 巴比妥缓冲液 * 所有纤维膜完全湿透后才能开电源。 * 染色液回收，漂洗液倒掉。 * 1.离心机要在天平上配平。2.先把缓冲液液面降至略高胶床面，确保胶床不暴露于空气中，以免稀释蛋白溶液。3.用滴管吸取沿管壁缓慢加入，避免冲起胶床。4.做好标记，不要混淆清蛋白和球蛋白。5.不要错过蛋白质收集的机会。峰值判断：第二滴沉淀远明显于第一滴时。 * * 生物化学与分子生物学实验教学中心 生物化学与分子生物学实验教学中心 血清清蛋白、g-球蛋白的分离、提纯与鉴定 2009年秋季学期 * 内 容 实验目的 1 实验原理 2 实验材料 3 实验过程 4 5 注意事项 2009年秋季学期 * 实验目的 掌握盐析法分离蛋白质的原理和基本方法 掌握凝胶层析