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2016年306西医综合考研生化复习笔记(二)
七、蛋白质的分离和纯化
1、沉淀,见六、2
2、电泳 :蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的 ,在电场中能向电场的正极
或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
4、层析:
a.离子交换层析 ,利用蛋白质的两性游离性质 ,在某一特定 PH时 ,各蛋白质的电荷量
及性质不同 ,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析 ,含负电量小的蛋白质
首先被洗脱下来。
b.分子筛 ,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内 ,滞留时间长 ,大分子蛋白质不能时
入孔内而径直流出。
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5、超速离心 :既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白
质其密度与形态各不相同而分开。
第二章 核酸的结构与功能
一、核酸的分子组成 :基本组成单位是核苷酸 ,而核苷酸则由碱基、戊糖和磷酸三种成
分连接而成。
两类核酸:脱氧核糖核酸(DNA) ,存在于细胞核和线粒体内。
核糖核酸(RNA),存在于细胞质和细胞核内。
1、戊糖:DNA分子的核苷酸的 糖是β-D-2-脱氧核糖,RNA中为β-D-核糖。
2、磷酸:生物体内多数核苷酸的磷酸基团位于核糖的第五位碳原子上。
二、核酸的一级结构
核苷酸在多肽链上的排列顺序为核酸的一级结构 ,核苷酸之间通过3′,5′磷酸二酯键连
接。
三、DNA的空间结构与功能
1、DNA的二级结构
DNA双螺旋结构是核酸的二级结构。双螺旋的骨架由 糖和磷酸基构成,两股链之间
的碱基互补配对,是遗传信息传递者,DNA半保留复制的基础,结构要点:
a.DNA是一反向平行的互补双链结构 亲水的脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外
侧 ,而碱基位于内侧 ,碱基之间以氢键相结合 ,其 ,腺嘌呤始终与胸腺嘧啶配对 ,形成两
个氢键,鸟嘌呤始终与胞嘧啶配对,形成三个氢键。
b.DNA是右手螺旋结构 螺旋直径为2nm。每旋转一周包含了10个碱基,每个碱基
的旋转角度为36度。螺距为3.4nm ,每个碱基平面之间的距离为0.34nm。
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c.DNA双螺旋结构稳定的维系 横向靠互补碱基的氢键维系,纵向则靠碱基平面间的
疏水性堆积力维持,尤以后者为重要。
2、DNA的三级结构
三级结构是在双螺旋基础上进一步扭曲形成超螺旋 ,使体积压缩。在真核生物细胞核内 ,
DNA三级结构与一组组蛋白共同组成核小体。在核小体的基础上,DNA链经反复折叠形
成染色体。
3、功能
DNA的基本功能就是作为生物遗传信息复制的模板和基因转录的模板,它是生命遗传
繁殖的物质基础,也是个体生命活动的基础。
DNA中的核糖和磷酸构成的分子骨架是没有差别的,不同区段的DNA分子只是碱基
的排列顺序不同。
四、RNA的空间结构与功能
DNA是遗传信息的载体,而遗传作用是由蛋白质功能来体现的,在两者之间 RNA起
着中介作用。其种类繁多 ,分子较小 ,一般以单链存在 ,可有局部二级结构 ,各类 RNA在
遗传信息表达为氨基酸序列过程中发挥不同作用。如:
名 称功 能
核蛋白体 RNA (rRNA)核蛋白体组成成分
信使 RNA (mRNA)蛋白质合成模板
转运 RNA (tRNA)转运氨基酸
不均一核 RNA (HnRNA)成熟 mRNA的前体
小核 RNA (SnRNA)参与 HnRNA的剪接、转运
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小核仁RNA (SnoRNA)rRNA的加工和修饰
1、信使RNA(半衰期最短)
1)hnRNA为m
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