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学案55 植物组织培养技术及
DNA和蛋白质技术
考纲要求 1.植物组织培养技术的应用。2.DNA的粗提取与鉴定。
一、植物组织培养
1.脱分化:由________的植物组织或细胞产生______的过程。
2.愈伤组织:细胞排列________而无规则,是一种____________的呈____________的________。
3.再分化:脱分化产生的____________继续培养,重新分化出________和________等器官的过程。
4.植物组织培养的理论基础:植物细胞的________。
5.基本过程:离体的植物组织____________________→________→移栽成活
二、DNA的粗提取与鉴定
1.提取原理:(1)利用DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的________中溶解度不同进行分离。在2 mol/L的该溶液中________溶解而________析出,在0.14 mol/L溶液中________溶解而________析出。(2)DNA不溶于酒
精,而________等杂质分子溶于酒精。
2.鉴定原理:在沸水浴条件下,DNA遇________试剂会被染成________。
三、多聚酶链式反应扩增DNA片段
1.PCR技术的原理:利用了________原理。通过控制________来控制DNA双链的解聚和结合。
2.PCR反应的条件:一定的________,DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种________,四种__________,耐热的________,同时控制______使DNA复制在体外反复进行。
想一想 细胞内DNA复制与细胞外DNA复制必需的酶是什么酶?
四、血红蛋白的提取和分离
1.分离方法——________法和电泳法。
2.纯度鉴定——一般用____________________方法对血红蛋白进行纯度鉴定。
探究点一 植物的组织培养
1.填表比较花粉植株的产生与植物茎的组织培养
菊花茎的组织培养 月季的花药培养 理论依据 细胞的______ 基本过程 脱分化、再分化 影响因素 选材、营养、____、pH、温度、光照等 材料选取 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 通常选择完全未开放的____ 光照状况 每日用日光灯照 12h 开始____光照,幼小植株形成后____光照 操作流程 制备MS固体培养基→______消毒→接种→____→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→____和诱导→移栽→栽培选育 结果 ____植株 ______植株 2.生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特点如下表,请补充完整。
激素使用 实验结果 使
用
顺
序 先生长素后细胞分裂素 有利于细胞____ 先细胞分裂素后生长素 细胞____________ 生长素与细胞分裂素
同时使用 分化频率____ 生长素用
量与细胞
分裂素用
量的比例 该比值高时 利于______的分化,抑制______的形成 该比值低时 利于____的分化,抑制____的形成 该比值适中时 促进________的生长 思维拓展
1.实验操作中应注意的几个问题:(1)材料的选取:菊花的组织培养实验中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝;月季花药的培养实验中,应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养。(2)外植体消毒:所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。(3)培养过程:在初期,菊花的组织培养需光照,月季花药的培养不需光照,而在后期均需光照。
2.花药培养过程中,确定花粉的发育时期可进行镜检,镜检前染色处理,染色方法有醋酸洋红法和焙花青—铬矾法两种,后者能将花粉细胞染成蓝黑色。
探究示例1 下列关于植物组织培养的叙述,错误的是( )
A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同
听课记录:
探究点二 DNA的粗提取与鉴定
1.简述DNA粗提取与鉴定的基本原理。
2.完成该实验的实验步骤与鉴定图表:
(1)步骤:提取血细胞核物质(______涨破)→溶解(2 mol/L的NaCl)→过滤(除杂质)→析出(滴蒸馏水,降NaCl浓度至______ mol/L)→过滤→再溶解(______ mol/L的NaCl)→过滤→进一步提纯(体积分数为________的冷却酒精)→鉴定。
(2)鉴定
比较 加入物质 结果 图示 实
验
组 均加入:①____ mL二苯胺试剂
②______
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