几种简便的木质素降解真菌定性筛选方法(论文资料).pdfVIP

2002年29(1) 微生物学通报 几种简便的木质素降解真菌定性筛选方法 蔡磊尹峻峰杨丽萍张克勤 云南大学省工业微生物发酵工程重点实验室昆明650091) 摘要：简要介绍几种在前人基础上作r较大改进的本质素降解真菌的定性筛选方法，列出 了每种方法的具体步骤并作r讨论。 关鲁词：木质素，降解，真菌，筛选 中图分类号：Q93 文献标识码：A 文章编号：0253—2654(加02)01—0067—03 蜘w口胁L ME睡口吩SH崛唧SCR口野I矾G0F QI，AI肌AⅡVE DEC0劓吧oSEUGND● FUNGITO cAIMYⅣ胁胁YANG u-PiIlg珊Am融QiIl (脚∞矿mmⅫRMⅢm，hⅢ∞U，l¨呻，㈣650(p1) Abs嘣：seva寸艘modshtlle wdtjI_r。dL删ln吐li8 qualit撕ve9∞ellil唱of缸蟛10de岬delI印in p珥H．w洫 fbrcach delailed口D幻colsaIld击scu姗ngas蹄y _‘呵啪tdb：LjgⅡ血．D比ⅡI■嘴iIlg．FIm画．s(脒曲iIlg 1838年A．Paven用硝酸处理木材，发现除剩下像纤维状的物质之外，还有一部分 含碳量比纤维状物质还要高的物质，前者他定义为“celIulose”(纤维素)，后者1857年 由F．schuze定义为“Ligmn”(木质素)。木质素是由苯丙烷类似物为单元构成的一大 类生物多聚体，是自然界最难降解的生物高聚物。它构成木材成分的20％～30％，仅 次于纤维素，其降解成为自然界碳素循环的决速步骤-1J。且木质素与纤维素和半纤维 素的结合非常紧密，从而阻碍了对纤维素和半纤维素的利用。世界上每年产生1．5×1∥ t以上的纸浆，在此过程中产生约5．0×107t的木质素l…。另外，有研究表明，很多水 体污染物的结构与木质素有着比较类似的结构，因此，对木质素降解作用的研究对造 纸，环保等都具有重要意义。 目前已知的常见于白腐真菌的3类木质素降解酶是：uP(木质素过氧化物酶)、 M11P(锰依赖过氧化物酶)和Lacca∞(漆酶)，木质素的降解也与这些酶的产生密切相 关，本文介绍的方法对于定性检测这些酶的产生有很好的效果。 在前人的研究中．已经报道了一些木质素酶定性检测的方法【3’5’7’8J．本文在总结前人 方法的基础上作了较大的改进，使检测方法更加简洁，更加实用，成本更低。 l材料与方法 1．1材料 基本培养基(以下简记为BM培养基)：酵母膏：0Olg，葡萄糖029，定容lmL， 自然pH值(如待测的是海洋真菌，则用海水线与海水盐分相同的水配制)。 收稿日期：a00l∞．20，修回日期：2∞1—04—29 万方数据 -68- ，擞生物学通报 20∞年29fj) 1．2方法 1．2．1 478)是一种多聚染料，LiP，MnP及 Poly—R琼脂半板脱色圈法：P0ly—R(sigma bocase的产生都会使其脱色”J，足术质素降解酶定性捡测的最直接方便的方法之～． 它在不使用H202的情况下就可检测到LiP的产生，但Laccase漆酶的检测会有一点问 题，因为并不