LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离培养及鉴定.pdfVIP

LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离培养及鉴定.pdf

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中国肿瘤生物治疗杂志 h ttp: / /www. b iother. org Ch in J Cancer B iother, Apr. 2010, Vol. 17, N o. 2 # 149# DOI: 10. 3872/j. issn.. 2010. 02. 007 # 基础研究# LoVo 、 张洪也, 程 勇, 胡 祥, 吕 原, 武乃金 (重庆医科大学附属第一医院 胃肠外科, 重庆 400016 [ ] 目的: 从结肠癌 LoVo细胞系中分离、鉴定具有 CD44+ /EPCAMhigh 特异表型的结肠癌干细胞样细胞, 察其生物 学行为, 证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法: 从普通血清培养的 LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有 CD44+ /EPCAMhigh 表型的细胞, 接种于添加生长因子的无血清培养基中, 察其增殖过程, 继而诱导分化。MTT 法、流式细胞 术检测 CD44+ /EPCAMh igh、EPCAM low和未分选 LoVo细胞的增殖能力及细胞周期分布。3种细胞接种裸鼠, 比较不同细胞的成 瘤率; 免疫荧光技术检测小鼠次代 CD44+ /EPCAMhigh 细胞中 CD44 /EPCAM 的表达。结果: LoVo细胞中有 17. 4% 的 CD44+ /EPCAMhigh 细胞, 并能在添加生长因子的无血清培养基中呈细胞球样生长, 且可连续传代; 在血清的诱导下, 呈贴壁分 化生长, 其形态与未分选 LoVo细胞无差别。CD44+ /EPCAM high细胞增殖能力高于 EPCAM low 细胞及未分选 LoVo细胞, 且细胞 + high 4 low 周期多集中在 G /G 期。以500个 CD44 /EPCAM 细胞接种裸鼠成瘤率为 90% ( 9 / 10 , 而 1 @10 个 EPCAM 细胞成瘤率 0 1 为 0 ( 0 / 10 。小鼠移植瘤中次代 CD44+ /EPCAMhigh 细胞仍能少量表达 CD44和 EPCAM。结论: LoVo细胞中存在 CD44+ / EPCAMhigh 结肠癌干细胞样细胞, CD44+ /EPCAMhigh 可用于结肠癌肿瘤干细胞的深入研究。 [] 结肠癌; LoVo细胞株; 肿瘤干细胞; 干细胞样细胞; CD44/EPCAM [] A [] ( 2010 0220 149206 Isolation , culture and identification of colon cancer ste 2like cells fro LoVo cell line ZHANG H ong2ye, CHENG Yong, HU X iang, LV Yuan, WU N ai2j in ( Deparmt ent ofGas

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