PZR基因的定点突变表达和纯化.pdfVIP

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China Biotechnology, 2009, 29( 3): 36~ 40 PZR 1, 4 2 3 2 2 1 2* 莫 毅 王 伟 梁方方 杨旭芬 宋 茜 蒋和生 W ayneZhou ( 1 530004 2 ) ( 3 530001 4 530021 ) 为获得纯化的单磷酸化 PZ 蛋白, 使用双磷酸化位点的H isPZ 重组原核表达载体为模 板,采用重叠延长 PC 定点 变技术分别构建: PZ Phe (TTT)和 PZ Phe ( TTT)重组原核表 263 241 达载体,并与CSrc重组原核表达载体共同转化E. coli BL21菌株, 通过 IPTG诱导表达, N iNTA 纯 化, 获得了单磷酸化的 PZ a和 PZ b蛋白, 为进 一步研究 PZ 内的不同 IT IM 基序与酪氨酸磷 酸酶间的作用机制及其在信号转导过程中的功能奠定了基础 PZ 免疫受体酪氨酸抑制基序 定点 变 表达 纯化 392. 11 [5~ 7] ( mi munoreceptor , PZ SHP2 [7~ 9] tyrosinebased inhibition motifs, ITIM ) L/ I/V / , SHP1 PZ SXYXXL/V ( X) PTPs, PZ 2 , ITIM PTPs, [1, 2] ITIM , ( protein tyrosine kinase, HisPZ PTK) Src, ITIM , , PC , SH2( src homology2) PZ a( Tyr ) PZ b( 241 ( SHP1, SHP2 SHIP)ITIM Tyr ), ; , 263 ( protein tyrosine CSrcE. coli BL21 phosphatase, PTPs), , IPTG, N iNTA , PTK, PZ a PZ b, , 1 [ 3, 4] PZ ( protein zero related) Zh izhuang Joe Zhao 1. 1 unxiang Zhao( 1994) H isPZ (2 + SHP2 , AMP ) CSrc + [ 5] MyelinP0, (Kan ) E. c

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