高亲和铵转运因子在春小麦中的遗传转化研究.pdf

黑龙江农业科学2014(6)：1～4 Sciences HeilongjiangAg“cuItural 高亲和铵转运因子在春小麦中的遗传转化研究 张宏纪。刘东军，孙岩。郭怡瑶。刘文林。杨淑萍。宋凤英 (黑龙江省农业科学院作物育种研究所，黑龙江哈尔滨150086) 摘要：为了培育可高效吸收利用铵态氮的小麦品种，将高亲和铵转运因子AtPRP3一AtAMTl；1融合基因导入 优质强筋小麦品种龙辐18中，利用基因枪法对3760个小麦幼胚愈伤组织进行了轰击。结果表明：经过筛选 分化共获得69株抗性苗。用2对特异引物对转基因植株进行检测，成功获得4个转基因植株，转化率为 O．11％，可作为选育高亲和铵转运因子小麦的原始材料。 关键词：小麦；基因枪法；高亲和铵转运因子 中图分类号：S512．103文献标识码：A 文章编号：1002—2767(2014)06一o001一04 氮素是植物合成蛋白质、核酸和氨基酸等的 就可以使其从贫瘠土地中有效吸收氮肥。铵转运 必需元素之一，对作物的生长发育、产量形成及品 因子在根系中的过量特异表达提高了番茄抗低氮 质优劣等具有重要影响。氮肥的使用大大提高了 胁迫能力和氮肥的利用效率，改善了果实品质，同 农作物产量，然而氮肥的过量使用也会导致氮肥 时延缓了衰老，提高了叶绿素含量[6‘7]。利用生物 的大量流失和利用效率的大幅下滑，我国每年约 技术培育高亲和铵转运因子的作物品种成为解决 有1000万t纯氮损失，氮肥的利用效率平均仅氮肥利用效率低的有效途径。该研究通过基因枪 32％～35％，对生态环境也构成了严重威胁[1]。 因此，提高作物对氮素的利用效率已成为降低农 合基因转化至黑龙江省主栽强筋小麦品种龙辐麦 业生产成本及缓解环境压力的突破口。 18中，培育高亲和铵转运因子的小麦新品种，为 土壤中的铵态氮和硝态氮是高等植物根系吸 在小麦生产过程中减少氮肥施用量、降低生产成 收无机氮的主要形式，一般来说，NH才被优先吸 本减轻环境污染等提供技术储备。 收利用，植物对铵态氮表现出明显的偏好性[2]。 1材料与方法 但是，铵盐的浓度在土壤中通常较低，硝酸盐是铵 1．1材料 盐浓度的10～1000倍[3]。农作物根系从土壤中 供试受体材料是黑龙江省农业科学院作物育 对铵的吸收主要由根细胞质膜上相应的NH≯转 种研究所培育的优质强筋小麦品种龙辐麦18，供 运因子(AMT)负责HJ。铵转运因子主要由 AtAMTl和AtAMT2两大基因家族编码，其中 南开大学生命科学院王宁宁教授提供，菌株质粒 AtAMTl家族基因对NH≯的亲和力最高，可以 载体为pCAMBIAl301。 特异性地将铵离子从细胞外转移到细胞内[5]，这 X 磊 lI|| ：砉 圣一 一 舸瑚， 罔1 AtPRP3 AtAM，Il；1融合基洲结构一 Thestructureoffusion Fig．1 geneAtPRP3一AtAMTl；1 1．2 方法 1．