输血前相容性检测阎.pptVIP

+ + +聚凝胺 + 无凝集 + 有凝集反应 - - - - - 枸橼酸纳- - - - - 聚凝胺试验 优点：简便快捷，可用于某些不完全抗体检测。 缺点：对无唾液酸的红细胞无作用， 例如多凝集红细胞。 可增强自身抗体或冷凝集素干扰。 注意事项：抗原抗体比例适当 聚凝胺（1液）去除干净。 微柱凝胶免疫学技术 聚凝胺试验 酶介质凝集试验 盐水介质凝集试验 抗人球蛋白试验 增强技术 抗人球蛋白试验 酶介质凝集试验 原理：红细胞表面有丰富的唾液酸，带有负电荷，使红细胞相互排斥。蛋白水解酶能消化破坏这种唾液酸，减少红细胞表面的负电荷以及红细胞之间的排斥力，缩短了红细胞之间的距离，使IgG分子能与有相应抗原的红细胞产生凝集。 酶介质凝集试验 ●常用的酶：菠萝酶、木瓜酶、胰酶、无花果酶。 ●方法：Ⅰ期法-酶液直接加入血清和细胞的混合物中。 Ⅱ期法-用酶处理细胞再与血清 进行反应。 ●两种方法比较：Ⅰ期法 操作方便 Ⅱ期法 敏感 酶介质凝集试验 ●优点： 可以增强一些抗原抗体系统的反应活性 Rh和Kidd系统最明显 ●缺点： 会破坏一些抗原的结构(M、N、Fya、Fyb) 酶液批次不同，都需标化最适孵育时间。 操作繁复，少数人对酶液过敏。 微柱凝胶免疫学技术 聚凝胺试验 酶介质凝集试验 盐水介质凝集试验 抗人球蛋白试验 增强技术 抗人球蛋白试验 增强技术 ●白蛋白增强凝集法 ★原理：白蛋白能提高红细胞悬浮液中的介电常数，从而降低zete电位，缩小了细胞间距离，增加细胞与细胞的接触面。 ★应用：血型鉴定和交叉配血 ★结果判定：出现凝集和溶血现象为阳性结果。 增强技术 ●低离子强度盐溶液（Liss）法 ★原理：在凝集反应第一阶段，若降低介质的离子强度，就会减少红细胞周围的阳离子云，促进带正电荷的IgG与带负电荷的红细胞发生反应。 ★注意事项：不能增加额外血清量 延长孵育时间会使某些抗原 变质，如Fya。 抗体筛选及鉴定 交叉配血 红细胞抗原抗体检测技术 红细胞抗原抗体检测技术应用 红细胞抗原抗体检测技术 血型鉴定 ABO血型鉴定 ●方法：常用室温盐水技术检测红细胞上 的血型抗原，以及血清中存在的血型 抗体。结果判定参见凝集试验。 ●ABO血型鉴定的常规试验： 1、正定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。常规用抗A抗B 2、反定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。常规用A、B和O三种红细胞。 正反定型的意义 ◆准确的血型判定利于指导临床用血 ◆发现亚型 ◆抗原强度的改变与疾病相关 ◆新抗原出现与疾病相关 ◆排除假阴性或假阳性结果干扰 ABO血型反应格局 血型 正定型 反定型 抗A 抗B Ac Bc Oc A + - - + - B - + + - - O - - + + - AB + + - - - Cells v Serum Serum v Cells ABO亚型鉴定 ◆亚型通常表现为凝集反应强度弱，或正、反定型不符 ◆增加试剂：抗A1-区分A1和A2 抗H-有较强的H抗原性 抗A,B-与Ax的反应强度增强 ◆增加方法：吸收放散试验 唾液中血型物质鉴定 PCR方法 Rh血型鉴定 ▲红细胞Rh表型可用特殊的具有抗D、C、c、E、和e抗血清检测来鉴定。但常规只用抗D血清检查有无D抗原 ▲D抗原阳性者为Rh阳性，否则为阴性 Rh血型鉴定方法 ● Rh抗体属IgG类，一般不能在盐水介质中与红细胞发生凝集，因此须采用以下鉴定方法（其中一种）： 1、酶介质法 2、抗人球蛋白法+增强试验 （Liss/白蛋白技术） ●RhD检测常用盐水法。 血型鉴定 交叉配血 红细胞抗原抗体检测技术 红细胞抗原抗体检测技术应用 红细胞抗原抗体检测技术 抗体筛选及鉴定 抗体筛选和鉴定 ●有临床意义的抗体：