紫外线对黑腹果蝇的生物学效应6.pptVIP

紫外线对黑腹果蝇的生物学效应 周二（5、6、7） 第六组 组员：黄永耀、张旭山、张雁敏 陈燕、罗阳超、刘强 二、仪器、材料和试剂 ⑴仪器用具 培养瓶、紫外光源、滤纸、烧杯、高压灭菌锅、灭菌空瓶 ⑵实验材料 野生型黑腹果蝇 ⑶实验试剂 蔗糖、玉米粉、琼脂、丙酸、酵母粉、乙醚 三、方法与步骤 ?培养基的配制： 将13g蔗糖和1g琼脂置于大烧杯内，加150ml蒸馏水后煮沸，使琼脂全部溶解，同时将17g玉米粉放入容器中加入150ml蒸馏水搅拌均匀。把以搅拌均匀的玉米糊倒入大烧杯内，小火加热至沸腾。停火2min加入丙酮酸0.8ml充分搅拌后装入培养瓶，用高压灭菌锅灭菌半小时后，置阴凉处待冷却。在无菌状态下操作滤纸条倒入酵母粉1g待用。 五、结果分析 1、紫外线对果蝇后代数量的影响 紫外线照射后,各处理与对照相比,F1代的影响均不显著，F2和F3出现了显著或极显著的差异,而以60秒处理的效应最明显，后代数仅有对照的1/3。 2、紫外线对果蝇后代性比的影响 把各种处理所得的后代雌雄个体分别计数,经X2测验，并与对照相比,紫外线照射的后代性比(雄：雌)均无显著性变化，在计数时发现，羽化初期雌蝇较多，几天后就可达到平衡。 六、结论 野生型黑腹果蝇经紫外线连续3代处理，随着照射时间延长显著的，每代均表现显著的生物学效应。这些生物学效应主要是子代数量减少，羽化连续时间缩短，体重减轻，而且有致畸效应，但处理后的子代性别比例变化不大。 * 自然界中广泛存在着各种射线，它们对物体均有不同程度的影响。当生物体受到照射时，可导致生物体的基因突变或染色体畸变。紫外线属于非电离射线，对单细胞生物作用明显。现在，对多细胞生物的作用也有不少研究。用紫外线照射果蝇，以探讨照射后代的畸形率、子代的数量、体重、性别比等方面的变化进而研究射线对其他动物的影响，为人们在生活、生产等方面合理利用紫外线提供依据。 一、实验原理 野生型 ②处理方法： ⑴先收集果蝇并放入瓶中培养，选择羽化12小时内的雄果蝇进行照射，把雄果蝇预先麻醉,无菌操作,放在2600A,40w紫外光源下40cm处,照射时间为15、30、45、60秒,未经照射的作为对照组 ⑵把果蝇装入灭菌空瓶内,立即用黑纸包裹,避免光复活,4小时后取出与处女蝇同时放入培养瓶中,让其交配,每瓶放4对,各处理3瓶,设对照。 雄 雌 处女蝇的选取方法 雌果蝇生殖器官有受精囊，可保存交配所得的大量的精子，能使大量的卵细胞受精。因此，在做果蝇杂交实验的时候，雌果蝇必须是处女蝇，保证实验结果的可靠性。雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力。选择处女蝇时，先把培养瓶中的老果蝇全部除去，收集10小时之内羽化出来的新果蝇，麻醉后用放大镜在百瓷板上将果蝇雌雄分开，这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。如果要验证选取的处女蝇是否准确，先不要放入雄蝇，3天后看雌蝇是否产卵，如果产卵就不是处女蝇了。 ⑶6天后除去亲蝇,1-2天后出现子代成蝇,这时开始统计子代的数量(雌雄蝇分别计数)，记录从有成蝇到出净的羽化延续天数，统计性比。 ⑷每瓶随机收集20只果绳,称量它们的鲜,干重(烘至衡重)，每瓶收集1-2次。在统计子代数量的同时,观察记录突变和畸形及个体数。 ⑸在统计每代时,均从处理和对照组中继续选取羽化12小时内的雄蝇进行下代照射,处理方法同上代。经连续3代杂交和统计,分别记录各代的数据，每天计数2次,避免瓶内近交,直至各瓶内的子代出完为止。 ⑹最后进行归纳分析,求平均数,各处理与对照比较,进行t测验. ③培养条件：温度为25±1℃ 四、技术路线 培养基的配制→捕获果蝇→放入培养瓶中培养→选择羽化12小时内的雄果蝇进行照射（照射时间为15、30、40、60秒）→设对照（未经照射的雄果蝇）→放入灭菌空瓶内进行黑纸包裹→4小时后取出与处女蝇同时放入培养瓶中让其交配→6天后除去亲蝇，开始统计子代的数量、羽化延续天数、体重、性别比例和后代的畸形率→进行结果分析→得出结论 3、紫外线对果蝇后代羽化延续时间的影响 果蝇经紫外线照射后，羽化延续天数的变化是：各种处理的子代数量越多，羽化延续天数越多，反之则少。 4、紫外线对果蝇后代体重的影响 果蝇经紫外线照射后，可使子代个体的体重明显减轻。个体鲜重在F3代60秒处理组平均下降0.2mg,。至于个体干重在F2、F3,各处理组均有显著性差易。表明果蝇经照射后,体内代谢受阻,干物质积累减少。 5、致畸效应 果蝇被紫外线照射后,出现了一定的致畸效应,在各世代均有畸形个体出现,而且雌雄蝇都有，主要表现在个体发育迟缓,体形瘦小。 突变体示意图 *