N-乙酰半胱氨酸和微囊藻毒素-LR联合暴露对中国仓鼠卵巢细胞凋亡的影响.pdfVIP

环境与健康杂志2013年 lO月第30卷第 lO期 JEnvironHealth，October2013，Vo1．30，No．10 ·879 · · 基 础 与 应 用 · N一乙酰半胱氨酸和微囊藻毒素一LR联合暴露对 中国仓鼠卵巢细胞凋亡的影响 薛fi-1剑 ，李锦辉2杨明峰 ，崔留欣 ，张成鹏 ，焦建华z，张慧珍 1．郑州大学公共卫生学院，河南郑州450001；2．河南省对外科技交流中心 摘要：目的 研究 N一乙酰半胱氨酸(NAC)和微囊藻毒素一LR(MC—LR)联合暴露对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞凋亡的 影响。方法 取对数生长期细胞，分别加入0(对照)、1、5、10、20、30、40、50、60、80mmolL／的NAC溶液以及终浓度为0、1、 5mmol／L的NAC溶液+终浓度为0、2．5、5、10p~g／ml的MC—LR溶液培养 24h。采用四甲基偶氮唑蓝 (M1Tr)试验检测细胞 活性 ，采用 2，7一二氯荧光乙酰乙酸盐 (DCFH—DA)法检测细胞内活性氧 (ROS)含量的变化，采用四氯四乙基苯并咪唑基 羰花青碘化物(JC一1)荧光探针法检测线粒体膜电位的变化 ，采用膜联蛋白v一异硫氰酸荧光素，碘化丙啶(AnnexinV— FITC／PI)双染法检测细胞凋亡率。结果 1、5mmoVLNAC单独作用对细胞活性无明显抑制作用，且细胞存活率均在80％ 以上；NAC与MC—LR同时作用时，细胞活性增加，ROS含量减少 ，线粒体膜电位升高，凋亡率减少。结论 MC—LR可诱导 CHO细胞产生大量 ROS从而引起细胞凋亡，抗氧化剂NAC可拮抗 MC—LR诱导ROS生成导致的细胞凋亡。 关键词 ：微囊藻毒素一LR；N一乙酰半胱氨酸；活性氧；细胞凋亡；中国仓鼠卵巢细胞 中图分类号：R994．6 文献标志码：A 文章编号 ：1001—5914(2013)10—0879—03 EffectsofN-acetylcysteineandmicrocystin-LR incombinationon apoptosisofChineseham sterovarycells XUE Li— jian，LIJin—hui，YANGMing-feng，CUILiu—xin，ZHANGCheng-peng，JIAOJian-hua，ZHANGHui—zhen．CollegeofPublic Health，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou， ’nan450001，China Correspondingauthor：ZHANG Hui—zhen，E—maiZ：huizhenl8@126．corn Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofN—acetylcysteine(NAC)andmicrocystin—LRincombinationonapoptosisof Chinesehamsterovarycells．M ethods ThelogarithmicphaseCHO cellswereused andtreatedbydifferentconcentrationsof NAC (0，1，5，10，20，3O，40，50，60and80mmol／L)alone，simuhaneouslytreatedbyNAC (0，1，5mmol／L)andMC—LR (0，2．5，5，10Ixgm／1)for24h．ThechangesofcellviabilityweredeterminedbyMrITI、method．ThechangesofROSinCHO cellsweremeasuredbyDCFH—DA．Thechangesofmitochondrialmembranepotential(MMP)wereiudgedbyafluorescent probeJC一1staining．TheapoptosisrateofCH0 cellswasmeasuredbyAnnexinV—PIs