核因子κB在重症急性胰腺炎模型肝脏损伤中的作用.pdfVIP

核因子一KB在重症急性胰腺炎模型肝脏损伤中的作用 田勇，谭纪伏 5002) (苏州市证医院本部普通外科，江苏苏州21 factor 摘要：目的研究核因子一KB(nuclear B，NF—KB)在重症急性胰腺炎(SAP)模型中的动态改变与肝 kappa 脏损伤变化的关系。方法24只健康雌性sD大鼠随机分为SAP组及假手术组。SAP模型经胆胰管内加压注射4％牛磺胆酸钠 h3个时间点将大鼠处死，留取肝组织苏木精一伊红染色下观察肝脏病理情况， 溶液1mL／kg完成。建模后24h、48h、72 外周血检测ALT水平，应用TransAMNF-K B的表达。结果48h肝脏病理示3区出现点状坏死， B065试剂盒检测肝组织NF_K 72h呈灶性坏死，均见核皱缩、碎裂．周围散在炎症细胞；SAP组NF—KB活性与ALT水平各时点渐次升高(PO．05)，各时 点SAP组NF—K 肝脏损伤变化，随炎症的持续肝损伤加重，肝脏核因子一KB在肝损伤中发挥重要作用。 关键词：重症急性胰腺炎；肝损伤；核因子一KB 中图法分类号：R657．51 文献标识码：A 文章编号：1009—881X(2006)03—0346—02 acute 重症急性胰腺炎(severepancreatitiS， inflam— SAP)常引起全身炎症反应综合症(systemic min，取 置于肝素钠抗凝瓶中，离心(2000rpm／min)l matoryresponsesymdrome，SIRS)，若不及时有 上清冻存备枪；同时取约0．5cm见方的肝中叶组织2 效的治疗，可并发多器官功能障碍综合症(multiple 块，置于液氮中保存备检。 organdysfunctionsymdrome，MODS)，死亡率高 1．2检测指标及方法 达15％～20％Ill。NF—KB作为一种重要的多极性 1．2．1肝脏病理检查肝组织用多聚甲醛同定，石蜡 细胞转录核因子，能够调控多种与炎症有关的细胞 包埋，制成组织切片，用苏木素一伊红(HE)染色。 因子12l，参与机体免疫、炎症和细胞再生、凋亡1．2．2肝组织NF—KB活性测定包含有NF—KB的 等过程。有关NF—KB在SAP肝损伤中作用的研 NF—K 究多涉及AP早期阶段，本试验拟通过建立大鼠BELISA SAP模型，检测较晚期肝组织中NF—KB的活性 本抽提物分别加入完全缓冲液中，置于100rmp的振 与肝脏损伤之间的关系，以初步探讨sAP肝脏动器上室温下孵育lh，200“IJ孔清洗液洗3次，加 NF—KB活性的动态变化及可能意义。 入100¨I_／孔NF—KB抗体，孵育lh后洗3次，加 入100斗L／孑LHRP第二抗体，孵育1h后冲洗4次， 1材料与方法 1．1试验动物及分组 处测量吸光度OD值。 健康SD大鼠24只，清洁级，体重250—3009， 1．2．3血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定采用全自动 南苏州大学医学院实验动物中心提供；动物按明暗 生化分析仪(OLYMPUSAU一2700)检测。