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酚红血浓度的测定
摘要:目的 通过观察家兔经过耳缘静脉注射酚红后,经过一定时间血药浓度的变化而掌握其测定方法,并计算出其半衰期和表观分布容积。为研究药代动力学提供理论支持。 方法 家兔一侧耳缘静脉注射酚红后经过一定时间在另一侧耳缘静脉取血,测定其浓度。由于酚红在家兔体内的代谢属于一级消除,故根据相应的一级消除动力学公式可计算出t1/2和Vd的值。 结果及结论 经过实验可得:酚红在家兔体内代谢时有t1/2 =25.67min ,Vd=0.246L。
关键词:t1/2 Vd 药代动力学
药物进入体内后都要经过这样的步骤进行代谢:吸收,分布,代谢,排泄。对以上步骤进行定量分析,有助于我们了解药物在体内的变化并对其进行精确的研究。本实验所用的酚红经静脉注射后,在体内不被代谢,不易扩散,故可以通过比色法来测定血药浓度。而酚红的代谢满足一级消除动力学,从而可以对t1/2 , Vd 进行计算而得出其值。
一 实验材料及方法
1.1
实验动物:健康家兔
实验药品:标准酚红溶液,稀释液。
实验器材:兔盒,手术刀片,注射器,试管,试管架,移液管,洗耳球,加样器,棉球,离心机,手术灯,分光光度计,称。
1.2
取家兔一只,称重。放入兔盒内。
在一侧耳缘静脉取血1.5ml置于含有肝素的干燥试管中,震动。然后从同侧耳缘静脉注射酚红溶液6ml/kg。
经过一定时间后从另一侧耳缘静脉取血1ml,置于肝素化的试管中,震荡。并记录好取血的开始时间和结束时间。
如上,再进行三次取血。
将所取的血液进行离心,离心10min,然后取上清0.2ml,置于5只试管,加入稀释液3ml,摇匀,静置。
与650nm波长下进行比色,记录。
计算半衰期和表观分布容积。
二 实验结果
根据以上实验步骤可得到如下四组数据:表1
表1 测量所得结果 组号 开始时间 结束时间 等效时间 吸光度 1 5 17 10.6192 0.207 2.5
20 21 20.65 0.165 21 22 21.65 0.083 30 33 31.5236 0.054 2 5 11 7.9667 0.235 2.5 11 16 13.4769 0.475 20 26 23.0369 0.195 30 34 31.9852 0.193 3 5 8 6.4768 0.721 2.5 50 53 51.4768 0.930 60 69 64.3053 0.380 70 71 70.6550 0.194 4 5 6 5.6434 0.286 2.5 50 51 50.4962 0.085 60 67 63.3251 0.054 72 74 73.0347 0.034
根据以上数据计算可得如下结果:表2
表2 实验计算结果 组号 t1/2(min) Vd(L) 时——量曲线 a b r 1 9.1913 0.258 2.2154 -0.032743 -0.908067 2 30.7599 0.3033 2.108985 -0.009784 -0.537602 3 43.3017 0.124 2.533839 -0.00695 -0.638942 4 19.3961 0.2973 2.098403 -0.015516 -0.985688 均数 25.66225 0.24565 标准差 140.083551361
备注:以上实验数据处理所用处理软件为:
由以上表格可以得到: t1/2 =25.67min ,Vd=0.246L。
三 实验讨论
药物的半衰期,表观分布容积等是药代动力学的基本数据,对他们的测定有助于对药物的研究,如上述实验就可测得酚红在家兔体内代谢时,其t1/2 =25.67min ,Vd=0.246L。借助以上方法,可以对其他药物进行药代动力学研究。
由上可以看出,在计算半衰期时,由于各组的操作及个体原因,导致标准差过大。这可以通过由一个人只负责一项操作等方式来减少误差。
在实验过程中,应注意以下几点:
比色时不要用手触摸比色皿光面,有液体在上面时应用擦镜纸擦拭干净。
取血前应把毛取出干净,以免发生血凝。
可用手术灯照射兔耳朵,加热其温度而使血管扩张充盈。
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