一种应用 LORF11同源子鉴别诊断鸭瘟病毒的 PCR方法.pdfVIP

江苏农业学报(JiangsuJ.of Agr.Sci. ),2014,30(5):1071~1076 http:/ / 1071 许梦微,张传健,周 希,等. 一种应用LORF11同源子鉴别诊断鸭瘟病毒的PCR方法[J].江苏农业学报,2014,30(5):1071- 1076. doi:10.3969/ j.issn.1000-4440.2014.05.023 一种应用 LORF11 同源子鉴别诊断鸭瘟病毒的PCR 方法 1,2 1,2 3 1 1 1 许梦微 , 张传健 , 周 希 , 王志胜 , 侯继波 , 王继春 (1.江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏 南京 210014; 2.南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210095; 3.无锡市锡山区城区畜牧兽医站,江苏 无锡 214101) 摘要: 为建立一种鉴别诊断鸭瘟病毒的PCR 方法,根据已发表的8 株鸭瘟病毒株的长区开放阅读框 (LORF11)等位基因序列,在其开放阅读框等位基因的上游5 bp和下游101bp 的位置设计 1对特异性引物。 应用 这对引物对鸭瘟病毒 LH2011株、v2085 株、VAC株、Clone-03 株 DNA进行 PCR扩增,分别获得了4 448 bp、3277 bp、934 bp和2 518 bp 的特异性条带。 此PCR方法特异性强,敏感性高,可检测到10TCID 或0.1LD 的鸭瘟病毒。 50 50 在感染鸭瘟病毒的组织(肝脏)中均能检测到鸭瘟病毒DNA。 对疑似鸭瘟的临床病料的检测结果也证明,建立的 PCR方法不仅能够鉴别样品是否感染了鸭瘟病毒,而且能鉴别感染的鸭瘟病毒的来源。 关键词: 鸭瘟病毒; LORF11同源子; 聚合酶链式反应; 鉴别诊断 中图分类号: S858.32 文献标识码: A 文章编号: 1000-4440(2014)05-1071-06 PCR analysis for differential diagnosis of duck enteritis virus based on LORF11 homologue 1,2 1,2 3 1 1 1 XU Meng-wei , ZHANG Chuan-jian , ZHOU Xi , WANGZhi-sheng , HOUJi-bo , WANGJi-chun (1.NationalResearch Center of Veterinary Biologicals Engineering and Technology,JiangsuAcademy of Agricultural Sciences,Nanjing 210014,China; 2.College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China; 3.Animal Husbandry and Veterinary Station of Xishan Dis- trict,Wuxi214101,China) Abstract: Todevelop aPCRmethodfor differential diagnosisof duckenteritisvirus (DEV),apair of PCRprimers was designed at5 bp upstream and 101bp downstream of its open reading frame based on published LORF11homo