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RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响.pdf
JMicmbiol No.9
史垡趁生堑堂塑鱼瘥堂盘查垫!Q生2屋筮塑鲞复!翅Chin lmmunol,September2010,V01.30r
.基础免疫学.
RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对
结肠癌细胞周期的影响
王峰 丁伟峰 王敬春 景蓉蓉 倪红兵 丛辉 王跃国 鞠少卿 王惠民
【摘要】 目的探讨沉默增殖诱导配体(aproliferation—inducingligand,APRIL)基因对人结肠
癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响。方法将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA.
contr01)及未转染组
APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting
PeR和Western
(nontransfeetedcontr01)作为对照。Real-timeblot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell
countingkit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因
p21及p27的表达。结果与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制
APRIL h、72h和96h后细胞增殖
mRNA及蛋白的表达(P0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48
能力明显下降(P0.05);转染48h,siRNA-APRIL组G0/GI期细胞比例增高,s期及G2/M期细胞比
mRNA的表达上调(P0.05);而上述指标丽对照组
例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27
之间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论siRNA—APRIl,能特异性抑制结肠癌SW480细胞
APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G。/G。期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表
达有关。
【关键词】增殖诱导配体;小干扰RNA;结肠癌;细胞增殖;细胞周期
cell ofcoloncarcinomaSW480cells
Effectofa siRNAOn WANG
proliferation.inducingligand cycle
Jing-chun,riNGRong—rong,NIHong—bing,CONGHui,WANGYue-guo,
凡昭‘,DINGWei-feng,WANG
JU Clinical
Shao-qing,WANGHui一删h‘Departmentof laboratoryCenter,AffiliatedHospitalofNantong
2260D1.China
University.Nantong
author:WANG
Corresponding Hui—min。Email:ntfyjyk@pub.tit.jsinfo.net
To theeffectsofa
【Abstract】Objectiveinvestigate proliferation-inducingligand(APRll.)gene
sinail cell and ofcoloncarcinomaSW480ceils.
silencingby interferingRNA(siRNA)oncycleproliferation
MethotisThesiRNA vector APRIL transfectedinto
plasmidtargetinggene,named鹊siRNA.APRll.,Was
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