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RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响.pdf

JMicmbiol No.9 史垡趁生堑堂塑鱼瘥堂盘查垫!Q生2屋筮塑鲞复!翅Chin lmmunol,September2010,V01.30r .基础免疫学. RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对 结肠癌细胞周期的影响 王峰 丁伟峰 王敬春 景蓉蓉 倪红兵 丛辉 王跃国 鞠少卿 王惠民 【摘要】 目的探讨沉默增殖诱导配体(aproliferation—inducingligand,APRIL)基因对人结肠 癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响。方法将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA. contr01)及未转染组 APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting PeR和Western (nontransfeetedcontr01)作为对照。Real-timeblot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell countingkit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因 p21及p27的表达。结果与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制 APRIL h、72h和96h后细胞增殖 mRNA及蛋白的表达(P0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48 能力明显下降(P0.05);转染48h,siRNA-APRIL组G0/GI期细胞比例增高,s期及G2/M期细胞比 mRNA的表达上调(P0.05);而上述指标丽对照组 例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 之间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论siRNA—APRIl,能特异性抑制结肠癌SW480细胞 APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G。/G。期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表 达有关。 【关键词】增殖诱导配体;小干扰RNA;结肠癌;细胞增殖;细胞周期 cell ofcoloncarcinomaSW480cells Effectofa siRNAOn WANG proliferation.inducingligand cycle Jing-chun,riNGRong—rong,NIHong—bing,CONGHui,WANGYue-guo, 凡昭‘,DINGWei-feng,WANG JU Clinical Shao-qing,WANGHui一删h‘Departmentof laboratoryCenter,AffiliatedHospitalofNantong 2260D1.China University.Nantong author:WANG Corresponding Hui—min。Email:ntfyjyk@pub.tit.jsinfo.net To theeffectsofa 【Abstract】Objectiveinvestigate proliferation-inducingligand(APRll.)gene sinail cell and ofcoloncarcinomaSW480ceils. silencingby interferingRNA(siRNA)oncycleproliferation MethotisThesiRNA vector APRIL transfectedinto plasmidtargetinggene,named鹊siRNA.APRll.,Was

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