SO2和NO2胁迫对红花荷等植物光合生理影响及抗性评价.pdfVIP

生态环境学报 2012, 21(6): 1063-1070 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@ 辽东湾大凌河口湿地土壤微生物群落分析 * 关晓燕，韩家波 ，王摆，董颖，姜北，陈仲，杨爱馥，王召会，周遵春 辽宁省海洋水产科学研究院，辽宁省海洋环境监测总站，辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室，辽宁 大连 116023 摘要：土壤微生物对湿地生态系统的物质转化和能量流动具有重要作用，目前对天然湿地的微生物资源及群落结构缺少研究。 应用PCR-DGGE技术研究辽东湾大凌河口湿地土壤中的微生物群落结构，并对其群落组成进行分析，结合冗余分析(RDA) 方法考察环境因子对微生物群落结构的影响。共设定7个站位采集土壤样品，直接提取样品中微生物的总DNA ，以巢式PCR 扩增细菌 16S rDNA-V3区片段，应用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分离片段，研究河口区湿地土壤细菌的群落结构。结果 表明：辽东湾大凌河口区土壤具有较为丰富的细菌种群，主要包含Proteobacteria 、Actinobacteria 和Bacteroidetes几大类门， 且同一季节采集的样品在聚类分析图上聚类成簇。RDA分析表明，土壤的温度与盐度2个变量分别解释了6.5%、2.3%的土壤 细菌群落结构变化，表明大凌河口区土壤的群落结构变化是多种环境因子共同作用的结果，其中温度的影响略大于盐度。 关键词：湿地土壤；微生物群落；DGGE ；聚类分析；RDA 中图分类号：X172 文献标志码：A 文章编号：1674-5906 （2012 ）06-1063-08 河口湿地是河流与海洋在入海口处相互作用 胶电泳(PCR-DGGE)技术，选择对大多数细菌和古 形成的，是海陆相互作用最为显著的地区，作为 细菌的 16S rDNA基因都能有效扩增的引物进行 一个多功能的复杂生态系统，具有独特的生态价 PCR扩增，然后对PCR产物采用变性梯度凝胶电 值和资源潜力，常被称为“ 自然之肾” [1] 。湿地土 泳进行分离，最后通过分子鉴定得出自然环境中 壤微生物是湿地生态系统的重要组成部分，是表 微生物群落多样性的信息[6] 。同时结合冗余分析 征湿地生态现状的生物标志物[2] 。目前，国内外 (Redundancy Analysis ，RDA)将多个环境因子和环 学者对湿地微生物的研究多集中于人工湿地 境样本数据进行多元回归，探讨大凌河口湿地土 中微生物的研究，对天然湿地微生物研究的报 壤微生物群落结构分布特征及其在不同的时空下 道相对较少 [3] 。微生物群落及其多样性分析是 (环境压力下)变化趋势，为河口湿地的微生物资源 湿地微生物研究的热点，它指在一定区域内或 利用提供基础研究资料。 生境下，微生物组成、数量及相互关系。其决定 1 材料与方法 了湿地生态功能的特性和强弱，是实现生态功能、 1.1 研究地点概况 [4] 标记环境变化的重要因素 。 辽东湾大凌河口湿地位于辽宁省辽东湾辽河 基于河口湿地海陆交互、物质梯度变化的特 三角洲湿地西部，是由河流冲积沉积物和海水沉 殊环境，其具有独特的微生物群落和基因资源， 2 。作为辽河三角洲湿地 积物组成，面积 1 016 km 这些微生物对湿地生态系统中的物质转化、能量 的重要组成部分，它不仅是我国河口湿地的典型 流动起着重要作用[2] 。其群落组成随着温度，